首页 > 文献资料
-
肿瘤坏死因子-α对体外培养的人眼小梁细胞基质金属蛋白酶-3和基层金属蛋白酶-9表达的影响
目的 探讨肿瘤坏死因子-α,(tumor necrosis factor-α,TNF-α)对体外培养的人眼小梁细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP-3、MMP-9)表达的影响.方法 对人眼小梁细胞(human trabecular cells,HTCs)进行体外原代培养及传代培养.取传3代的小梁细胞分别施加含TNF-α终浓度为0(对照组)、1mg/ml、10mg/ml、25ng/ml的无血清培养液,48h后采用免疫细胞化学法观察小梁细胞MMP-3、MMP-9的染色变化.对结果进行计算机图像分析并进行统计学检验. 结果 利用免疫细胞化学法检测1ng/ml、10 ng/ml、25 ng/ml的TNF-α实验组小梁细胞MMP-3的平均灰度值分别为138.63±8.15、138.73±7.02、129.25±10.47.均低于对照组平均灰度值143.53±6.01.且各实验组与对照组比较差异均有显著性(P＜0.05);实验组小梁细胞MMP-9的平均灰度值分别为137.60±11.53、125.20±17.29、119.88±12.47,均低于对照组平均灰度值145.30±7.05,且各实验组与对照组比较差异均有显著性(P＜0.05).结论 TNF-α在一定范围内促进小梁细胞MMP-3及MMP-9的表达,增加了小梁网异常堆积的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的降解,使房水流出增加,眼压降低.
-
白细胞介素-1β对人眼小梁细胞基质金属蛋白酶-3表达的影响
目的 观察自细胞介素-1β(IL-1β)对体外培养的人眼小梁细胞基质金属蛋白酶-3(matrix metallo-proteinases 3,MMP-3)表达的影响.方法 采用组织块培养法对人眼小梁细胞(human trabecular cells,HTCs)进行体外原代及传代培养,取传3代小梁细胞分别加入含有IL-1β终浓度为0 ng/ml(对照组)、5、10、25、50 ng/ml的无血清培养液,24 h后采用RT-PER法及ELISA法检测MMP-3量的变化.结果 RT-PCR法检测IL-1β终浓度为5、10、25、50 ng/ml实验组MMP-3/GAPDH的相对灰度比值分别为0.3437±0.0764、0.8588±0.0443、1.0079±0.0347、1.3466±0.0309,均高于对照组的相对灰度比值0.1037±0.0494,且各实验组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);ELISA法检测IL-1β终浓度为5、10、25、50ng/ml实验组的MMP-33浓度值分别为(2.0325±0.2456)ng/ml、(2.4607±0.350)ng/ml、(2.8532±0.1392)ng/ml、(3.5858±0.1141)ng/ml,均高于对照组的浓度值(1.2437±0.3910)ng/ml,且各实验组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 IL-1β在一定范围内促进MMP-3的表达,并且呈现一定的剂量依赖性,推测IL-1β可以通过促进MMP-3的表达来减少小梁网组织细胞外基质(ECM)的堆积,使房水引流通畅,降低眼内压.
-
体外培养人眼小梁细胞Ang Ⅱ的表达
目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在体外培养的人眼小梁细胞(TMC)中的表达情况.方法 原代和传代培养人眼TMC株,收集第3代人眼TMC用于制作细胞爬片.利用免疫组织化学染色法和Western blot法检测体外培养人眼TMC中AngⅡ蛋白的表达.结果 传代培养的人眼TMC呈典型梭形,免疫组织化学检测显示体外培养的人眼TMC细胞膜和细胞质中可见AngⅡ的阳性颗粒,阴形对照片中未见有AngⅡ蛋白表达.Western blot法在相对分子质量为64 000处可见一明显蛋白条带,为AngⅡ蛋白的阳性表达.结论 AngⅡ在体外培养的人眼TMC中呈阳性表达,提示AngⅡ可能参与青光眼眼压和房水循环的调节.
-
地塞米松对人眼小梁细胞紧密连接相关蛋白表达的影响
病理性眼压升高多源于房水排出受阻,与小梁网内皮小梁细胞形态和功能的变化密切相关.小梁细胞间存在紧密连接,对细胞内外各种物质的交换起调节作用[1-3].紧密连接由跨膜蛋白、细胞质附着蛋白和细胞骨架蛋白组成,水控蛋白-1、闭合蛋白、连接黏附蛋白(Junctional Adhesion Molecule-1,JAM-1)组成紧密连接的跨膜结构[4-9],3种蛋白的失衡直接影响小梁细胞间紧密连接的结构和功能,从而改变小梁网的通透性.皮质类固醇性青光眼是否有细胞间紧密连接的改变尚不明了.本研究观察地塞米松对人眼小梁细胞水控蛋白-1、闭合蛋白、JAM-1表达的影响,探讨皮质类固醇性青光眼可能的发病机制.
