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中草药初提物对肺癌细胞 A549的生长抑制及诱导调亡作用
目的：肿瘤是因细胞增殖、凋亡等调控机制异常而引起的疾病，目前依然严重危害着人类健康。文中主要探究中草药初提物诱导肺癌细胞凋亡和抑制增殖的作用。方法以肺癌细胞A549为对象，实验设空白对照（0 ng／mL）、中草药初提物设不同剂量（170、340、680 ng／mL）组，培养箱中24、48 h培养。采用CCK8法和LDH法检测中草药初提物对肺癌细胞的生长抑制作用；利用荧光显微镜、流式细胞仪检测细胞调亡；以实时定量PCR和蛋白免疫印迹法检测中草药初提物对hTERT mRNA、Cleaved caspase-3和Cleaved PARP蛋白的相对表达量。结果随着初提物浓度（170、340、680 ng／mL）和处理时间（24、48 h）的增加，A549细胞存活率也随之降低，损伤率提高（P＜0．05），IC50为510 ng／mL。空白对照（未用药处理）无DNA损伤的细胞表现为一圆形荧光细胞核，680 ng／mL A549细胞DNA呈典型的凋亡彗星尾形状。680 ng／mL初提物作用后A549尾部DNA含量较空白对照增加（P＜0．01）。流式细胞分析仪检测表明，随着初提物浓度的升高和处理时间的延长，A549细胞凋亡率逐步升高。340 ng／mL提取物处理A549细胞24 h后hTERT mRNA表达量较0 h下调[0．25（0．23～0．28） vs 1．00（0．91～1．09）]，差异有统计学意义（P＜0．01）。随初提物浓度增加，A549 Cleaved caspase3和Cleaved PARP表达量增多。结论初提物通过下调hTERT mRNA表达，促进Cleaved caspase-3、Cleaved PARP蛋白的表达来诱导细胞凋亡。
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部分中草药促凝作用筛选的实验研究
目的从药典已有记载或文献报道凝血效果较好的20多种促凝中草药,筛选出凝血时间短,促凝效果好的中草药.方法用家兔体外凝血实验,对20余种具有止血作用的中药和民间草药初提物及有机溶剂萃取提取物的对比研究,观察了凝血时间(CT)(凝血板法,试管法)、凝血酶原时间(PT)、血浆复钙时间(RT)等指标.结果发现采自云贵高原的一种多年生草本植物(简称HB)初提物及其氯仿萃取纯化后的水相提取物的凝血时间、凝血酶原时间、血浆复钙时间与空白对照组比较显著缩短(P<0.01),并且凝血时间比研究中的其它中草药初提物和对比物明显缩短(P<0.01).结论 HB及氯仿萃取纯化后的水相提取物有明显的体外促凝血作用,氯仿萃取纯化后的水相提取物是其有效部位.
