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尿激酶受体基因文献资料
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T-载体在聚合酶链反应扩增产物克隆中的应用
目的探讨克隆聚合酶链反应(PCR)扩增产物的简便方法.方法用PCR方法分别特异性扩增Wilms瘤基因wt1和尿激酶受体(UPAR)基因,并利用Taq聚合酶具有的延伸酶活性将扩增产物直接克隆入T-载体,EcoRⅠ酶切鉴定阳性重组子.结果设计的引物可分别扩增wt1基因锌指区(343bp)和UPAR基因编码区全长(1083bp);未经修饰的常规PCR和高保真PCR扩增产物可被直接克隆入pGEM-T Easy载体,其中正确重组率为62.5%~87.5%;克隆的wt1基因和UPAR基因已被成功用于竞争性PCR或表达.结论 T-载体法是克隆PCR产物通用而有效的方法.
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逆病毒载体介导尿激酶受体基因在乳腺癌细胞表达的研究
大量的临床研究证实尿激酶(uPA)及其受体(uPAR,CD87)表达与肿瘤细胞的侵袭与转移能力相关[1].uPAR是一种由糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定于细胞膜的糖蛋白,通过将uPA活性定位于细胞表面(即胞周)而调节蛋白水解过程[1,2].本研究我们利用逆病毒载体将uPAR基因导入低侵袭性乳腺癌细胞MCF-7,为客观评价uPAR基因过表达与乳腺癌细胞侵袭及转移的关系提供了实验模型.