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抗体CDR-H3区段的免疫信息学分析
抗原结合部位亲和力是其组成氨基酸理化特性、结构特征的集中体现.CDR-H3位于抗体的抗原结合部位中心,构象多变.本研究从人抗体CDR-H3的氨基酸分布序列信息入手,同时选取12个FDA已批准上市的治疗性抗体药物来分析抗体CDR-H3区段的结构特点.结果显示人H3区段高分布频率长度为12,出现概率高的氨基酸为Tyr,Tyr、Trp、Ser、Thr、Gly 5种氨基酸有助于抗原结合部位构象的形成;所选取的抗体药物CDR-H3区段的长度n∈[7,14],Base区域构象均隶属于K构型,β-发夹结构氢键分布变化各异,其中芳香族氨基酸侧链和带电氨基酸分布对抗原结合具有重要促进作用.
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柱前衍生-HPLC法同时测定不同产地茯苓中18种氨基酸含量
目的:建立柱前衍生-高效液相色谱法测定茯苓中18种氨基酸的含量.方法:以6 mol· L-1盐酸150℃水解1h,以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂衍生后进样分析.采用C18 110A色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),柱温43℃,流动相A为0.1 mol· L-1醋酸钠缓冲液(以醋酸调pH 6.5)-乙腈(93∶7),流动相B为乙腈-水(4∶1),进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长254 nm.结果:天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、丝氨酸(Ser)、甘氨酸(Gly)、组氨酸(His)、精氨酸(Arg)、苏氨酸(Thr)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)、酪氨酸(Tyr)、缬氨酸(Val)、蛋氨酸(Met)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、苯丙氨酸(Phe)、赖氨酸(Lys)、胱氨酸(Cys)、色氨酸(Trp)共18种氨基酸质量浓度在5.889.119.0 μg· mL-1范围内呈良好线性关系(r=0.999 9.1.000);平均回收率在93.3％～106.2％之间,RSD均小于3.0％.各产地均以脯氨酸、蛋氨酸和丝氨酸含量为高;聚类分析将12个产地分为三类.结论:本方法可用于茯苓药材的质量控制.
