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肝癌细胞乙酰胆碱酯酶表达水平与丙型肝炎病毒感染之间的相互影响
目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染对乙酰胆碱酯酶(AchE)表达水平的影响以及细胞内AchE活性的变化对HCV感染的影响.方法 以细胞培养来源的HCV(HCVcc)感染人肝癌细胞系Huh7细胞,用蛋白质印迹法以及实时荧光定量PCR(qPCR)进一步验证HCV感染对AchE表达水平的影响,AchE活性检测试剂盒检测细胞内AchE活性的变化.以AchE抑制剂多奈哌齐和伊托必利处理Huh7细胞,同时用HCVcc感染,通过蛋白质印迹法以及免疫荧光法检测Huh7细胞的HCV感染情况.用针对AchE基因的小干扰RNA(siRNA)转染Huh7细胞,随后用HCVcc感染Huh7细胞,通过蛋白质印迹法和免疫荧光法检测AchE的表达以及HCV感染情况.结果 HCVcc感染Huh7细胞60 h后,AchE蛋白表达水平升高,同时酶活性也增强(P均<0.01).AchE抑制剂呈浓度依赖性抑制HCV对Huh7细胞的感染(P<0.01).用siRNA敲低AchE的表达后,HCV对Huh7细胞的感染降低(P<0.01).结论 HCV感染Huh7细胞能上调AchE的表达并增强AchE活性,AchE表达增加和活性增强都能促进HCV的感染,表明AchE在HCV感染Huh7细胞的过程中起着正反馈增强感染的作用.
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当归多糖对老年痴呆小鼠脑组织钙超载及胆碱能神经损伤的影响
目的:观察当归多糖对老年痴呆小鼠脑组织钙超载及胆碱能神经损伤的影响,探讨当归多糖治疗老年痴呆的疗效及其作用机制.方法:健康昆明种小鼠72只,雌雄各半,随机分为空白对照组、模型对照组、脑复康组和当归多糖高、中、低剂量组.除空白对照组外,其余各组每日腹腔注射D-半乳糖120 μg/g和亚硝酸钠90 μg/g制备老年痴呆小鼠模型,空白对照组腹腔注射等体积的生理盐水,连续30 d.30 d后,腹腔注射同时,脑复康组给予脑复康200 μg/g,当归多糖高、中、低剂量组分别以400,200和100 μg/g灌胃给药;模型对照组及空白对照组灌服等体积的生理盐水,连续6周.采用比色分析法测定脑组织Ca2+浓度、Ca2+-ATPase、Ca2+Mg2+-ATPase、AchE活性.结果:与空白对照组对比,模型对照组脑组织Ca2+浓度、AchE活性升高,Ca2+-ATPase、Ca2+Mg2+-ATPase活性降低,差别有统计学意义(P＜0.01);与模型对照组对比,当归多糖各剂量组脑组织Ca2+浓度降低,Ca2+-ATPase、Ca2+Mg2+-ATPase活性升高、AchE活性降低,差别有统计学意义(P＜ 0.01或P＜ 0.05);与脑复康组对比,当归多糖高剂量组差别有统计学意义(P＜ 0.05).结论:当归多糖治疗老年痴呆具有较好疗效,其效用可能是通过逆转小鼠脑组织钙超载和减轻胆碱能神经系统的损害实现的.
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合欢花总黄酮对抑郁模型大鼠学习记忆能力的影响
目的:研究合欢花总黄酮对抑郁模型大鼠学习记忆能力的影响及作用机制.方法:将90只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、盐酸文拉法辛组、合欢花总黄酮(100、50、25mg/kg)剂量组.以孤养加慢性不可预见性应激建立大鼠抑郁模型,并连续灌胃21 d,分别采用旷场试验、Morris水迷宫评价合欢花总黄酮对抑郁模型大鼠行为学、学习记忆能力的影响.并用酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定各组大鼠脑中5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)含量及乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠行为学得分、学习记忆能力及脑中5-HT、NE、DA含量均显著降低,脑中AchE活性增高.与模型组比较,盐酸文拉法辛组、合欢花总黄酮(100、50、25mg/kg)剂量组大鼠行为学得分、学习记忆能力及脑中5-HT、NE、DA含量均显著升高,脑中AchE活性降低.结论:合欢花总黄酮可明显改善抑郁模型大鼠的抑郁行为,增强学习记忆能力,其作用机制可能与增加脑中单胺类神经递质含量,降低AchE活性,增加Ach含量有关.
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多奈哌齐联合维拉帕米对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆功能的保护作用
目的:探讨多奈哌齐与维拉帕米联合用药对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆功能的保护作用.方法:SD大鼠40只,随机分为假手术组、模型组、多奈哌齐组和联合用药组,采用5μl Aβ1-40(2μg·μl-1)右侧海马区立体定向微量注射法制备大鼠AD模型,通过水迷宫实验评价对多奈哌齐与维拉帕米联合用药对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆功能的保护作用,并通过大鼠海马系数、乙酰胆碱酯酶(AChE)活性和尼氏染色的检测,评价其保护作用机制.结果:Morris水迷宫实验结果表明,同模型组比较,多奈哌齐组和联合用药组逃避潜伏游程均缩短;并且显著增加海马系数；AChE活性实验结果显示,同模型组比较,假手术组、多奈哌齐组和联合用药组海马组织AChE活性减弱；尼氏染色中,多奈哌齐组与联合用药组海马CA3区基本病变减轻,同模型组比较,锥体细胞排列较整齐,较紧密,胞浆内尼氏体较丰富,较清晰.结论:多奈哌齐和维拉帕米可降低海马组织中AChE活性,改善AD大鼠的学习记忆能力,且联合用药更佳.
