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  • 新型结核抗原肽的鉴定及在人免疫缺陷病毒感染人群结核诊断中的应用价值

    作者:周霞;周琼

    目的 筛选并验证主要组织相容性复合物-Ⅰ (MHC-Ⅰ)限制性结核抗原肽作为结核感染γ干扰素释放测定(IGRA)试剂在HIV感染人群结核诊断中的临床应用价值.方法 以RD区编码蛋白为候选抗原,利用计算机软件预测与HIV感染人群MHC-Ⅰ高频分子高度亲和的CD8+T淋巴细胞表位,人工合成含有CD8+T淋巴细胞表位的多肽进行体外筛选试验,用筛选所得混合多肽池为IGRA试剂,与相对分子质量为6 000的早期分泌抗原靶(ESAT-6)和相对分子质量为10 000的培养滤液蛋白(CFP-10)比较,在HIV感染人群中的灵敏度和特异度.结果 终获得8个重叠多肽池,Rv0222176-191、Rv1980c122-138、Rv1985c105-120、Rv3425141-165、Rv3873133-151、Rv3873158-166、Rv387878 86和Rv3879c673-690,可刺激结核患者外周血CD8+T淋巴细胞产生γ干扰素,但对健康对照PBMC无刺激效应.在检测25例结核分枝杆菌合并HIV感染者血样时,由这8个重叠多肽池混合而成的IGRA刺激剂(CP)的灵敏度与rESAT 6/CFP10 (CE)的灵敏度均较低(68%比48%,x2=2.052,P=0.152),但二者共同作为IGRA刺激剂(CP+CE)时灵敏度达92%,显著高于rESAT6/CFP10(x2=11.523,P<0.01),且不影响特异度.结论 筛选出来的含CD8表位的RD区合成肽可提高IGRA试剂盒检测HIV感染/艾滋病患者的灵敏度,进而提高该人群的结核病检出率.

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