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表达HSV-TK痘苗病毒真核表达载体pMJ601的构建与鉴定
目的:构建含自杀基因(HSV-TK)的痘苗病毒真核表达载体pMJ601,为进一步实施胃癌的基因治疗作必要准备.方法:利用目的基因与载体的连接、感受态细胞的制备及转化、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、酶切等多种基因工程技术将胶纯化回收的HSV-TK与pMJ601进行连接、转化及鉴定.结果:克隆在X-pPNT质粒上的HSV-TK DNA 成功地被克隆到经BamH Ⅰ-HindⅢ双酶切的pMJ601载体上.结论:重组HSV-TK痘苗病毒真核表达载体pMJ601的构建,为胃癌自杀基因的基因治疗打下坚实的基础.
关键词: 单纯疱疹病毒-胸苷激酶 pMJ601 构建 -
重组单纯疱疹病毒-胸苷激酶和人白介素-2基因痘苗病毒真核表达载体的构建
目的构建含单纯疱疹病毒-胸苷激酶(HSV-tk)和人白介素-2(hIL-2)基因的痘苗病毒真核表达载体pWJ601,为进一步实施胃癌的基因治疗作必要的准备.方法利用目的基因与载体的连接、感受态细胞的制备及转化、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、酶切、DNA序列分析等多种基因工程技术,将纯化回收的HSV-tk和hIL-2分别与pMJ601进行连接、转化并鉴定.结果分别用BamHⅠ-HindⅢ和SalⅠ-BmHⅠ酶切位点,将HSV-tk与hIL-2 DNA成功地克隆到pMJ601真核表达载体上.结论重组HSV-tk+hIL-2基因pMJ601的构建,为进一步研究胃癌的基因治疗打下坚实的基础.
关键词: 单纯疱疹病毒-胸苷激酶 白介素-2 pMJ601 构建