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海德堡青光眼早期诊断随访仪 HRT-Ⅱ原理及应用
控制青光眼重要的挑战就是早期发现疾病.海德堡青光眼早期诊断随访仪可及时、无创伤地采用激光扫描照相机获得视盘三维图像,并可利用共焦激光技术测量定量分析和随访青光眼视盘改变.
关键词： 青光眼 海德堡青光眼早期诊断随访仪 HRT-Ⅱ 共焦 -
针灸血清对大脑皮层细胞内钙离子的影响初探--针灸体液机理的研究
目的:观察针刺大白鼠经穴后的血清对体外培养的大脑皮层细胞内钙离子浓度的影响,以探讨针灸作用机理中是否存在着体液因素.方法:取新生大鼠大脑皮层细胞进行原代培养,7～10天后应用荧光分子探针Fluo-3AM染色,激光共焦扫描显微镜动态扫描观察加入正常血清和电针刺"百会""足三里""曲池""三阴交"的血清后神经细胞内钙离子的浓度变化.结果:加入正常血清后,细胞内的钙离子浓度会有一定的升高,经过一段时间后升高的钙离子浓度会趋向平稳;而再加入针刺血清后,在一定程度上可以降低神经细胞内钙离子的浓度.结论:针刺腧穴后,除了神经的调节机制外,针刺血清中存在着某种活性物质可以明显地使大脑皮层细胞内钙离子浓度降低.此为针灸体液因素的存在提供了直接的证据.
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上皮型钙黏附蛋白、CD44v6及连接蛋白43在肝细胞癌中的表达及意义
目的 研究上皮型钙黏附蛋白(E-cad)、CD44v6和连接蛋白43(Cx43)在人肝细胞癌(HCC)中的表达及其表达与患者性别、年龄和组织学分级的关系.方法 采用免疫荧光双标记染色技术结合激光扫描共聚焦显微镜观察E-cad、CD44v6及Cx43在30例正常肝组织,25例肝良性病变和38例HCC中的表达;另在HCC组检测并分析了该3种标记物的表达与性别、年龄和组织学分级的关系.结果 E-cad与Cx43均在正常肝组织及肝良性病变组高表达,而在HCC组表达都明显降低,前两组与HCC组间表达强度差异均有统计学意义(FE-cad=879.2,FCx43=303.7,P＜0.05).相反,CD44v6在正常肝组织及肝良性病变组表达较低,而在HCC中表达较高,差异有统计学意义(F=2057.2,P＜0.05).HCC组E-cad和Cx43阳性表达强度在患者不同性别、年龄及肿瘤的组织学分级间的差异均无统计学意义(P＞0.05);而CD44v6表达与HCC的组织学分级有关,HCC分化差,CD44v6表达高(t=-2.06,P＜0.05),但不同年龄、性别组HCC的CD44v6阳性表达强度差异无统计学意义(P＞0.05).HCC组E-cad与Cx43的表达呈正相关,而E-cad、Cx43与CD44v6的表达呈负相关.结论 HCC的发生、发展伴随着多种分子表型的改变.E-cad、Cx43的低表达与CD44v6的高表达可能参与HCC的侵袭,尤其是CD44v6的表达还与HCC的组织学分级相关.三者联合检测对判断HCC的诊断和预后有一定价值.
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不同转移潜能的人体横纹肌肉瘤细胞系细胞间通讯的研究
目的研究细胞间通讯功能在3种不同转移潜能的人体横纹肌肉瘤细胞系间及其与培养的正常人肌母细胞的差别及其意义.方法采用间接免疫荧光法,用激光扫描共聚焦显微镜定量测定与细胞间通讯有关的间隙连接蛋白(connexin43,CX43)的含量,并用荧光漂白后恢复技术检测间隙连接介导的细胞间通讯的功能.结果 CX43在正常肌母细胞中呈高表达,主要定位于细胞膜,有时定位于胞质,而在横纹肌肉瘤中表达下降;CX43阳性率及荧光强度均随着横纹肌肉瘤转移潜能的增加而降低(P＜0.05);荧光漂白后恢复技术结果显示横纹肌肉瘤细胞荧光漂白后恢复率下降而且与横纹肌肉瘤细胞的转移潜能呈负相关(P＜0.05).结论不同程度细胞间通讯功能的抑制可能与横纹肌肉瘤的转移潜能不同有关,其有可能成为判断横纹肌肉瘤恶性程度及预后的指标之一.
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猪内源性逆转录病毒体外感染人胚肾细胞系HEK-293的初步研究
目的对猪内源性逆转录病毒(PERV)体外感染人胚肾细胞系HEK-293的能力进行检测.方法建立体外感染人胚肾细胞系HEK-293的方法,用免疫电镜的方法观察PERV粒子,聚合酶链反应(PCR)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测与PERV共培养24 h后 HEK-293细胞基因组中PERV前病毒基因的整合、表达并对PERV亚型进行鉴定,激光共聚焦显微镜检测PERV-gag蛋白的表达并进行定量分析.结果电镜下可观察到PERV的圆形病毒粒子;与PERV共培养24 h后HEK-293细胞基因组中检测到PERV前病毒DNA,且mRNA也有效表达,PERV亚型为PERV-A,B型;激光共聚焦显微镜观察到PERV-gag蛋白在感染细胞HEK-293的胞质表达,但表达量下降.结论PERV具有体外感染人胚肾细胞系HEK-293的能力,病毒蛋白可以有效表达,因此在猪到人的异种器官移植研究中对PERV可能引起的人兽共患病进行安全性评价是极有必要的.
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复发性中耳炎中耳渗液细菌生物膜的观察及方法学研究
目的 观察细菌生物膜(bacterial biofilms,BBF)在复发性或顽固性中耳炎患者中耳积液的形成,探讨鲎试验及免疫荧光二重染色结合激光扫描共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)方法研究细菌生物膜感染的可行性.方法 抽取12例(18耳)复发性或顽固性中耳炎患者中耳积液分别行细菌培养鉴定、鲎试验检测细菌内毒素、免疫荧光双重染色标记后CLSM观察.结果 所有患者细菌培养鉴定阳性率为22.2％ (4/18)；快速凝胶法鲎试验检测细菌内毒素反应阳性率为72.2％ (13/18)；中耳积液标本行异硫氰酸荧光素标记的刀豆球蛋白(FITC-ConA)及碘化丙啶(PI)双重染色后,CLSM下见大量绿色荧光,代表该处较多多糖基质,其间有橙红色荧光,代表细菌和宿主细胞.其中稀薄、清亮积液标本的橙红色荧光明显较黏稠积液标本的弱.结论 复发性或顽固性中耳炎患者中耳积液存在细菌生物膜形成,中耳炎反复发作或迁延不愈可能与此有关；本研究建立的鲎试验及免疫荧光二重染色结合CLSM方法是检测细菌内毒素和观察BBF形成有效可行的方法.
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腺苷对海马神经元内钙离子振荡的作用研究
目的 在细胞水平研究腺苷对原代培养的SD大鼠海马神经元内钙离子振荡的具体影响,并探讨其可能的作用机制,从而为腺苷的抗癫痫作用提供实验依据.方法 本实验以SD大鼠新生48 h内的乳鼠作为取材对象,以胰酶消化加巴氏管机械吹打的方法,经条件培养基纯化建立原代培养海马神经元的研究模型.选取7～9 d的细胞,应用激光扫描共聚焦显微镜结合Fluo-3/AM标记技术,利用细胞外灌流方式给予腺苷的方法,检测腺苷干预前后钙离子振荡的相关指标.结果 原代培养的SD大鼠乳鼠的海马神经元在7～9 d发育基本成熟后可以观察到神经元内自发同步的钙离子振荡.给予腺苷后,发现Ade能抑制成熟海马神经元自发同步钙离子振荡的频率和幅度:频率从加药前的(0.020±0.003)Hz减少到(0.005±0.001)Hz,幅度从加药前的1.87±0.17下降到1.10±0.07,且这种抑制作用对于腺苷的浓度水平有一定的要求性.用高钾作为去极化刺激模拟癫痫状电活动时,钙离子震荡的频率加快,幅度增大,而腺苷对高钾诱发钙离子振荡的频率和幅度表现出了显著抑制作用.结论 在体外培养海马神经元的研究中发现,腺苷对海马神经元内钙离子振荡具有显著的抑制作用,这可能是腺苷作为内源性物质发挥抗癫痫作用的机制之一.
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共聚焦激光显微内镜对早期胃癌的识别和分类
目的 研究共聚焦激光显微内镜(CLE)识别早期胃癌(EGC)并对其进行分类的可行性.方法 选取完成CLE检查的182例患者的CLE图像,其中EGC 42例,高级别上皮内瘤变9例,低级别上皮内瘤变30例,胃炎52例,肠上皮化生49例.3名熟练掌握CLE诊断技术的内镜医师,根据已制定的胃黏膜病变的CLE诊断标准,以盲法对每例患者做出CLE诊断及分类,结果与组织学诊断比较.结果 CLE诊断胃癌的敏感性和特异性分别为88.1%和98.6%;如果把高级别上皮内瘤变归为癌性病变,敏感性和特异性则为90.2%和98.5%.而且,单纯依赖CLE图像区分EGC分化型和未分化型的准确性为84.9%;如果结合CLE和普通白光内镜图像,则准确性为94.4%.结论 CLE可以较准确地在体识别EGC并对其进行初步分类;CLE在EGC的诊断中具有很大价值.
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酸诱导酸敏感离子通道对佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞内 Ca2＋运动的影响
目的：探讨酸敏感离子通道（ASICs）与酸诱导的大鼠佐剂性关节炎（AA）关节软骨细胞Ca2＋运动的关系。方法雄性SD大鼠12只，分为正常组（ n＝6）和AA模型组（ n＝6）。模型组大鼠制备AA模型，体外培养AA关节软骨细胞，应用Ca2＋荧光指示剂Fluo-3/AM孵育培养的细胞，激光共聚焦显微镜检测有、无细胞外液以及PCTX对细胞外pH 6.0酸作用所致AA关节软骨细胞内Ca2＋荧光强度动态及Ca2＋浓度（[ Ca2＋] i ）变化。结果在无细胞外钙环境中，酸未引起AA关节软骨细胞Ca2＋变化，平均荧光值为45.63±16.38。而在胞外液有Ca2＋的情况下，pH 6.0可引起AA关节软骨细胞Ca2＋短暂性升高（149.56±25.39），与无钙组比较明显增加（P＜0.01）；PCTX对pH 6.0诱导AA关节软骨细胞Ca2＋内流明显抑制作用（60.85±28.73，P＜0.01）。结论 ASICs参与酸诱导的经AA关节软骨细胞Ca2＋内流，可能与关节软骨破坏有关。
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激光共聚焦扫描仪检测丙型肝炎蛋白芯片的临床应用
目的对LuxScan 10K激光共聚焦扫描仪的性能进行评估及对其与丙型肝炎蛋白芯片的临床应用进行研究.方法对LuxScan 10K激光共聚焦扫描仪性能进行评估;采用已获国家食品药品监督管理局批准的以酶联免疫吸附法(ELISA)为原理的丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒检测临床样本,判断丙型肝炎病毒抗体阴、阳性.对样本编盲后,样本与丙型肝炎蛋白芯片进行反应.芯片反应后,针对编号样本用LuxScan 10K激光共聚焦扫描仪和GenePix 4000B微阵列扫描仪分别进行检测.解盲,统计临床确诊阳性、阴性样本的检测情况,检测结果用SPSS11.0软件统计分析.结果LuxScan 10K扫描仪的检测能力能达到0.1荧光分子/μm2;动态范围＞103;具有较高的检测重复性、一致性.LuxScan 10K扫描仪与GenePix 4000B扫描仪扫描丙型肝炎蛋白芯片的结果与ELISA方法检测丙型肝炎病毒抗体的阳性符合率均为90.3%,检测结果差异无统计学意义;阴性符合率分别为83.9%和90.3%,检测结果差异无统计学意义.结论我国研制的LuxScan 10K激光共聚焦扫描仪性能已达国际同类产品水平,配合适用的生物芯片LuxScan 10K微阵列扫描仪可用于临床样本检测.
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β淀粉样蛋白对神经元上烟碱型乙酰胆碱受体β2亚单位表达的影响
目的观察β淀粉样蛋白25-35片断(Aβ25-35)对海马神经元的损伤,及神经元上烟碱型乙酰胆碱受体β2亚单位(β2-nAChR)表达的变化.方法实验组用不同浓度(1、5、10、20μmol/L)的Aβ25-35诱导原代培养的海马神经元损伤,用倒置显微镜及四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法观察各组的神经元形态及存活的变化;用免疫荧光法观察神经元上标记的β2-nAChR的表达的变化,并用激光扫描共聚焦显微镜行半定量.结果各实验组的神经元形态上有不同程度地受损表现;各实验组的吸光度(A)值较不加Aβ25-35的对照组减小,神经元上标记的β2-nAChR的平均相对荧光强度较对照组减小.结论Aβ25-35可引起海马神经元损伤,并减少海马神经元上β2-hAChR表达量,Aβ25-35浓度越高,β2-nAChR表达量越低.
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角膜激光共焦显微镜技术早期诊断老年2型糖尿病患者小神经病变的价值
目的 探讨角膜激光共焦显微镜用于早期筛查老年2型糖尿病患者小神经病变的诊断价值. 方法 前瞻性研究,连续收集2014年5月至2016年2月在我院内分泌科和眼科门诊的老年2型糖尿病患者(糖尿病组)96例,同期眼科门诊就诊非糖尿病患者为对照组(46例).糖尿病组根据有无糖尿病周围神经病变(DPN)分为DPN组49例和非DPN组47例. 结果 非DPN组患者病程较DPN组短(P=0.000).非DPN的糖化血红蛋白、尿微量白蛋白低于DPN组,差异有统计学意义(P值分别为0.072、0.007);DPN组较非DPN组角膜神经纤维密度降低(P=0.000);与对照组比较,非DPN组和DPN组患者角膜神经纤维密度降低(均P=0.000);非DPN组和DPN组角膜神经纤维数差异无统计学意义(x2 =2.391,P=0.314),非DPN组和DPN组较对照组角膜神经纤维数减少(x2值分别为16.014、17.188,均P=0.000).病程与角膜纤维密度的单因素线性回归分析结果显示,二者呈负相关.吸烟患者较非吸烟患者角膜神经纤维数减少(P=0.003).多元线性回归结果显示,病程为角膜神经纤维密度的影响因素. 结论 部分老年糖尿病患者在神经传导速度异常前,角膜神经纤维密度和数量已减少.角膜激光共焦显微镜技术可用于早期发现和诊断老年糖尿病患者小神经病变.
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共聚焦显微内镜对胃凹陷型病变的鉴别诊断价值
目的 共聚焦显微内镜(CEM)是将共聚焦显微镜整合于内镜头端的一种新型内镜,可在细胞水平观察活体组织.本研究目的是评价CEM在内镜检查的同时对胃凹陷型病变的病理预测价值.方法 应用CEM对43例患者的51个凹陷型病灶进行检查.将CEM诊断与相应部位活检标本的常规病理结果进行前瞻性和双盲对比.结果 对每个病灶的边缘和(或)中心的共172个点进行共聚焦扫描,获得4872幅共聚焦图像.CEM可以获得活体的胃黏膜表面和表面下清晰的细胞和胃小凹结构的荧光图像.CEM对胃癌诊断的敏感度、特异度和准确度分别为95.7%、97.6%、97.1%.结论 CEM可以在内镜检查的同时对胃癌组织做出准确度很高的虚拟病理学检查,对于胃凹陷型病变的鉴别诊断及胃癌的早期诊断具有较高的应用价值.
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高胆固醇对内皮祖细胞数量和功能的影响
目的观察高胆固醇血症患者外周血内皮祖细胞(EPC)数量和功能的变化.方法选择高胆固醇血症患者和非高胆固醇血症患者各20例,用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板,培养7 d后贴壁细胞进行细胞化学分析.激光共聚焦显微镜鉴定FITC-UEA-Ⅰ和DiI-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPC.采用MTT比色法、改良的Boyden 小室和黏附能力测定实验观察EPC的增殖、迁移和黏附能力.结果高胆固醇血症患者外周血EPC数量明显减少[(41.8±8.7 比 64.5±16.6) EPCs/×200视野,P<0.05],且EPC数量与血总胆固醇水平(r=-0.659, P<0.001)和低密度脂蛋白胆固醇水平 (r=-0.611, P<0.001)呈反向线性关系.高胆固醇血症患者EPC的增殖、迁移和黏附能力也明显受损.结论高胆固醇患者外周血内皮祖细胞数量减少、功能减退.
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急性心肌缺血时连接蛋白43迅速降解的非均一性研究
目的探讨急性心肌缺血时心肌细胞连接蛋白43(Cx43)含量和分布的改变.方法 20只犬随机分为4组,通过结扎冠状动脉造成分别为0、1、3、6 h的急性心肌缺血,应用激光共聚焦显微镜技术和荧光免疫组织化学方法对缺血心肌Cx43含量和分布的改变进行定量研究.结果急性心肌缺血1h ,Cx43像素密度较对照组减少22.2%(P<0.01),3h减少40.0%(P<0.01),6h减少53.8%(P<0.01).对照组心肌细胞端对端连接处Cx43含量约为侧对侧连接处的1.36倍,缺血6 h后,侧对侧连接处Cx43含量反而为端对端连接处的1.6倍.对照组各层心肌细胞Cx43含量无显著差异,缺血后,中间层心肌Cx43含量较其他层心肌Cx43含量下降更明显,差异有显著性(P<0.05或P<0.01).结论急性心肌缺血时Cx43迅速降解,分布模式也发生明显的改变,各层心肌Cx43的降解程度明显不均一.
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血管紧张素Ⅱ对模拟缺血心室肌细胞内游离钙的影响
目的研究血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)对模拟缺血心室肌细胞内游离钙离子浓度的作用.方法用胶原酶酶解法急性分离豚鼠心室肌细胞,经Fluo-3/AM负载染色后,用激光共聚焦扫描,测定荧光强度,反映细胞内游离钙离子浓度;采用低氧、无糖、高乳酸和酸中毒综合方式模拟缺血液灌流,造成细胞的模拟缺血,并在缺血的基础上观察Ang Ⅱ对模拟缺血心室肌细胞内游离钙离子浓度的影响.结果模拟缺血可缓慢增加心室肌细胞内游离钙浓度;Ang Ⅱ能使模拟缺血细胞内游离钙浓度增高,并呈脉冲式变化.结论 Ang Ⅱ能增加模拟缺血心肌细胞静息钙水平, 导致钙超载.
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钙离子在颞叶癫癎大鼠海马神经元内的动态变化
目的探讨海马神经元内钙离子浓度的动态变化在颞叶癫癎中的可能作用. 方法应用新一代钙荧光指示剂Fluo-3/AM,采用激光共聚焦扫描显微镜技术对颞叶癫癎大鼠海马神经元内的钙离子浓度变化进行动态观察. 结果各时间点癫癎组大鼠海马神经细胞的平均荧光像素数(3 h:634 942±27 735;12 h:697 066±14 863;7 d:732 844±23 107;60 d:800 030±16 450)均明显高于对照组(3 h:396 499±31 951;12 h:389 498±33 257;7 d:389 809±29 486;60 d:392 758±35 197),差异有统计学意义(P＜0.01);癫癎大鼠海马神经细胞内钙离子浓度的变化可分3个阶段:急性期细胞内的钙离子浓度先急剧升高,然后缓慢升高;静止期开始时钙离子浓度较急性期后期先稍有下降,然后再次缓慢上升;到慢性复发期,钙离子浓度达到高峰,并维持在高水平. 结论在颞叶癫癎的发生发展过程中海马细胞内存在钙稳态失调,该变化导致了神经元内游离钙离子浓度的急性和持久性升高,后者可能诱发了颞叶癫癎的自发性复发性发作.
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角膜共焦显微镜对于糖耐量异常患者周围神经病变的早期诊断
目的 通过角膜共焦显微镜(CCM)观察糖耐量异常(IGT)患者角膜神经的形态改变,量化分析和周围神经病变的相关性.方法 入选70例IGT患者,其中30例有周围神经病变,其余40例不伴有周围神经病变,另外选入年龄性别匹配的50名健康对照者,通过CCM观察所有入选者角膜上皮下神经的形态,量化分析各组间的不同.结果 IGT不伴周为神经病变者角膜神经纤维密度与健康对照组相比差异无统计学意义,但角膜上皮下神经纤维长度[(17.1±4.9)mm/mm2与(14.0±3.8) mm/mm2],神经曲折度[(2.07 ±0.76)级与(0.88 ±0.55)级]明显增加(t=13.484、12.957,均P ＜0.05),神经分支密度[(53.1 ±18.8) mm/mm2与(36.2±11.5) mm/mm2]亦明显增加(t=9.369,P＜0.01).而IGT合并周围神经病变组相比于健康对照组、IGT不伴周围神经病组,神经纤维长度、角膜神经纤维密度、神经分支密度均明显减少,神经曲折度进一步增加,差异均有统计学意义.结论 糖代谢异常患者在未诊断糖尿病前,就已经出现角膜神经形态改变；IGT患者在未出现周围神经病变前,就已经出现角膜神经形态改变,提示使用CCM进行角膜上皮下神经的形态结构观察对周围神经病变的早期诊断有一定的价值.
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荧光标记的突变型淀粉样前体蛋白裂解过程的细胞研究
目的 研究淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)酶解过程,构建含有Swedish和APP717两种突变的荧光真核表达系统.方法 以pcDNA3.0-APP为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)得到含有APP717突变的APP后300个碱基片段(C99);以pcDNA3.0-CFP-CaM-YFP酶切产物为模板,通过PCR分别得到编码蓝色荧光蛋白(CFP)和黄色荧光蛋白(YFP)碱基序列;生物合成含有Swedish突变的APP中间54个碱基片段(54 bp).利用基因工程技术将CFP、54 bp、YFP、C99片段克隆至载体质粒pcDNA3.0中,通过酶切、PCR、测序鉴定终得到重组质粒pcDNA3.0-CFP-54bp-YFP-C99和pcDNA3.0-CFP-54 bp-YFP,并将其转染至人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞中,利用多光子共聚焦显微镜观察荧光表达,检测荧光共振能量转移(FRET)以及免疫细胞化学染色观察B淀粉样蛋白(Aβ).结果 (1)基因序列分析证明重组质粒构建成功.(2)利用多光子共聚焦显微镜观察转染细胞,显示融合基因能够准确表达蓝色和黄色荧光.(3)表达CFP-54bp-YFP的细胞有FRET现象,而表达CFP-54bp-YFP-C99的细胞中观察不到FRET现象.(4)利用多光子共聚焦显微镜发现CFP-54bp-YFP-C99转染的细胞中有YFP标记的A13产生并沉积在胞质胞膜以及细胞间隙中.(5)免疫细胞化学检测证实CFP-54bp-YFP-C99经过裂解可以产生Aβ,Aβ在细胞膜、细胞质、细胞间隙聚集沉积.结论 (1)融合基因的表达产物能够完成APP的有序裂解产生Aβ.(2)Aβ有可能产生于APP由胞质至胞膜的运输过程中.(3)研究显示C99对于APP被裂解有重要意义,可能起到信号肽样的引导定位作用.(4)在细胞外形成沉积之前,Aβ已经在细胞内聚集导致细胞形态改变.
关键词： 淀粉样 B 蛋白前体 荧光共振能量转移 显微镜检查 共焦 转染 -
免疫细胞化学染色及激光扫描共聚焦显微镜技术在脑膜癌病早期诊断中的应用
目的 探讨免疫细胞化学染色及激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)技术在脑膜癌病(meningeal carcinomatosis,MC)早期诊断中的应用价值.方法 将所观察脑脊液标本分为MC组、非MC组(对照组),以Shandon Cytospin 4离心沉淀仪收集脑脊液细胞.分别进行Giemsa染色(42例)、联合癌胚抗原(CEA)免疫细胞化学染色(29例,对照20名)、免疫荧光双标记染色(17例,对照20名).CEA免疫细胞化学染色采用SP法,置于普通光学显微镜下观察;免疫荧光双标记染色以CyS荧光二抗及4,6-联脒-2-苯基吲哚分别标记抗CEA单抗及细胞核DNA,置于LSCM下观察,进行定位、定性、定量分析.结果 42例患者经脑脊液细胞学检查均发现异常细胞,首次脑脊液细胞学检查阳性率为85.7%(36/42),其中29例患者结合CEA免疫细胞化学染色,阳性率为79.3%(23/29),17例经免疫荧光双标记染色,13例阳性.MC组[CEA(+)者1694.69±478.06,CEA(-)者1543.04±364.71]与对照组(603.72±178.04)比较胞核DNA荧光相对含量[CEA(+)者t=21.386,CEA(-)者t=23.144,均P<0.01]差异有统计学意义;CEA荧光相对含量CEA(+)者(1407.04±275.30)与对照组(202.51±54.05)差异亦有统计学意义(t=42.934,P<0.01).结论 免疫细胞化学染色是诊断MC的重要定性手段,结合LSCM可将MC的诊断提高到定性、定位与定量相结合的新水平.
