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体外培养系统中各细胞组分在IL-18诱导的肿瘤特异性CTL中的作用
应用rhIL-18在体外培养系统(coculture system in vitro,CCS)中诱导肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxie T lymphocyte,CTL),探索不同细胞在IL-18起动和促进肿瘤特异性免疫应答方面的作用.采用StemSepTM免疫磁性细胞分离法分离人外周血NK细胞、T细胞及树突细胞(DC),流式细胞仪分析细胞表型,125I-UdR标记的细胞毒实验检测杀伤活性.结果表明,在肿瘤抗原存在的条件下,CCS中rhIL-18能够诱导并促进CTL介导的肿瘤特异性杀伤效应;并且,在rhIL-18诱导肿瘤特异性CTL的过程中,rhIL-18、NK细胞、DC及T细胞均起着十分重要的作用,缺少任一组份,均对诱导肿瘤特异性CTL有明显差异(P＜0.01).提示在CCS中,rhIL-18诱导的NK细胞快速杀伤效应及DC的抗原提呈作用,在肿瘤特异性CTL产生过程中,均起着决定性的作用.
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树突状细胞诱导的半相合CTL灭活后对小鼠移植肺癌的抑制作用
目的:探讨60Co灭活的树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导的MHC半相合细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxicity Tlymphocyte,CTL)回输的抗小鼠移植肺癌作用.方法:体外培养CB6F1小鼠来源的DC,流式细胞术检测DC表型,用CB6F1-DC诱导针对C57B L/6小鼠来源的转移性肺癌细胞(Lewis lung cancer,LLC)的细胞毒性T细胞(cytotoxicity T lymphocyte,CTL),经60CO灭活的CTL回输给荷LLC瘤C57 BL/6小鼠.细胞毒实验检测CTL细胞的抗肺癌效应,病理检测荷瘤小鼠肝、脾、小肠、皮肤变化,观察移植物抗宿主病(graft-versus-host-disease,GVHD)的发生及肺部肿瘤转移情况,观察荷瘤小鼠的存活时间.结果:流式细胞检测证实培养出成熟DC.DC诱导的CTL灭活后回输治疗LLC肺转移瘤小鼠后,小鼠肺质量显著降低[(0.27±0.06) vs (0.52±0.07)g,P ＜0.05],平均生存期显著延长[(78.10±16.50) vs(49.30±6.45)d,P＜0.05].荷瘤小鼠脾淋巴细胞对LLC细胞的杀伤活性随着效靶比的增加逐渐增强,大杀伤率可达(32.7±1.694)％(效靶比100∶1).病理检测结果显示,治疗组荷瘤小鼠未见明显GVHD.结论:灭活的半相合CTL回输可以诱导机体抗肿瘤反应,降低小鼠移植肺癌转移,未出现明显的GVHD.
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EBV-LMP2多肽所激活的特异性CTL对鼻咽癌细胞杀伤活性的研究
[目的]研究EB病毒编码的LMP2多肽片段所激活的肿瘤特异性CTL对鼻咽癌细胞的杀伤作用,探讨利用LMP2多肽对鼻咽癌进行免疫治疗.[方法]通过细胞免疫方法鉴定鼻咽癌细胞(CNE2)中的LMP2蛋白是否表达;外周血分离树突状细胞(DC)体外培养,以LMP2多肽片段负载DC激活产生特异性CTL;通过流式细胞仪、MTT法检测特异性CTL对CNE2细胞杀伤活性.[结果]在CNE2中表达LMP2蛋白,LMP2多肽所激活的肿瘤特异性CTL对鼻咽癌细胞具有杀伤活性.[结论]LMP2多肽片段所激活的肿瘤特异性CTL在体外对鼻咽癌细胞具有杀伤作用.
