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猪软骨文献资料
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猪IL-10在软骨细胞中的表达
为了构建猪IL-10真核表达载体并在猪软骨细胞中表达.将目的基因酶切连入真核表达载体pcDNA3.1,以FuGENE 6介导转入猪软骨细胞中表达,RT-PCR检测IL-10在软骨细胞中mRNA表达水平,ELISA检测细胞培养上清中IL-10蛋白含量.观察其对效应细胞PBMC分泌IFN-γ和软骨细胞MHC Ⅱ类分子表达的影响.结果显示,成功构建了猪IL-10真核表达载体,并转入软骨细胞,检测到细胞内IL-10 mRNA转录,细胞培养24、48和72 h后,经ELISA检测上清中IL-10蛋白含量分别为1 961.9、2 925.9和2 953.4 pg/ml,能明显抑制经PHA刺激的PBMC分泌IFN-γ(抑制率达68.1%)和软骨细胞MHC Ⅱ类分子的表达.猪IL-10真核表达载体的成功构建并在软骨细胞中表达,发挥其免疫调节功能,为研究IL-10诱导软骨细胞体内同种异体移植耐受奠定了基础.
