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脂多糖结合蛋白抑制肽对内毒素诱导的U937细胞TLR4的影响
目的研究脂多糖结合蛋白(LBP)抑制肽对内毒素(LPS)诱导的人单核巨噬细胞株U937细胞TLR4的影响.方法佛波脂(PMA)诱导U937成熟后分为5组,即正常对照组;LPS组;低剂量抑制肽组;中剂量抑制肽组;高剂量抑制肽组.用RT-PCR和蛋白定量方法(Western blot)测定TLR4 mRNA和蛋白的表达,ELISA测定培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量.结果LBP抑制肽组TLR4的mRNA,蛋白的OD值,TNF-α的浓度均较LPS组低,较正常组高.结论LBP抑制肽通过抑制由TLR4介导的LPS信号跨膜转导和TNF-α的分泌,对LPS所致疾病如脓毒血症、急性肺损伤可能有潜在的治疗作用.
关键词： 脂多糖结合蛋白抑制肽 脂多糖 CD14 肿瘤坏死因子-α -
LBP抑制肽对LPS诱导的小鼠内毒素血症肺组织NF-κB活性的影响
研究LBP抑制肽P12对脂多糖(LPS)诱导的小鼠内毒素血症肺组织核转录因子κB(NF-κB)活性的影响,探讨P12体内阻断内毒素信号转导通路的部分机制.40只小鼠随机分为5组:对照组、内毒素血症组、低剂量P12组、中剂量P12组和高剂量P12组,每组8只.腹腔内注射LPS复制内毒素血症模型,尾静脉注射P12,用免疫细胞化学染色图象分析法和蛋白质定量分析法(Western blot)测定小鼠肺组织NF-κB的活性; 硝酸还原酶法测定血清中NO的含量.结果:LPS刺激后NF-κB P65进入核内,P12组核易位明显减少.低、中、高剂量P12组P65核浆灰度(OD)比分别为1.45±0.53、1.24±0.34、0.84±0.75,明显低于内毒素血症组(3.08±0.16).低、中、高剂量P12组NO水平分别为(106.17±24.93)μmol/l、(80.84±19.23)μmol/L和(67.28±16.67)μmol/L,明显低于内毒素血症组(185.49±20.13)μmol/L.P12能显著抑制LPS诱导的小鼠内毒素血症肺组织NF-κB的活化,并降低其NO的释放.表明P12对内毒素血症可能具有潜在的预防和早期治疗作用.
关键词： 脂多糖结合蛋白抑制肽 脂多糖 核转录因子κB 一氧化氮 -
LBP抑制肽对内毒素诱导的脓毒血症小鼠的保护作用
目的 研究脂多糖结合蛋白抑制肽(P12)对内毒素脂多糖(LPS)诱导的脓毒血症小鼠TLR4、CD14及肿瘤坏死因子a(TNFa)表达和小鼠生存率的影响.方法 40只小鼠随机分为5组:对照组、内毒素血症组、低剂量P12组、中剂量P12组和高剂量P12组,每组8只.腹腔内注射LPS复制脓毒血症模型,尾静脉注射P12,蛋白定量方法 (Western blot)检测TLR4和CD14蛋白的表达,ELISA法检测小鼠血清中TNF-a的含量.结果 抑制肽组TLR4和CD14蛋白的OD值较LPS组低,较正常组高.脓毒血症组小鼠血清中TNF-a的含量显著高于对照组[(180.17±39.14)pg/mL比(24.88±5.82)pg/mL,P<0.01];低剂量P12组、中剂量P12组和高剂量P12组血清中TNF-a的含量分别为(112.69±19.78)、(86.34±9.25)和(70.48±8.48)pg/mL,均明显低于脓毒血症组(均P<0.05).结论 脂多糖结合蛋白抑制肽通过抑制由TLR4和CD14介导的LPS跨膜信号转导,降LSP诱导的TNFa的释放,提高了脓毒血症小鼠的生存率.表明脂多糖结合蛋白抑制肽对急性肺损伤或脓毒血症可能具有潜在的预防和早期治疗作用.
关键词： 脂多糖结合蛋白抑制肽 脂多糖 TLR4 CD14 肿瘤坏死因子a -
脂多糖结合蛋白抑制肽对内毒素诱导的人单核巨噬细胞株表达CD14的影响
目的研究脂多糖结合蛋白(LBP)抑制肽对内毒素(LPS)诱导的人单核巨噬细胞株U937细胞表达CD14的影响.方法佛波脂(PMA)诱导U937成熟后分为5组:正常对照组、LPS组(100ng/mL LPS+100ng/mL rhLBP)、低剂量抑制肽组、中剂量抑制肽组及高剂量抑制肽组,后3组分别给予10、100和1000 ng/mL抑制肽.用RT-PCR和蛋白定量方法(Western blot)测定CD14 mRNA和蛋白的表达,ELISA测定培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量.结果 LBP抑制肽显著抑制LPS刺激后U937细胞CD14的mRNA与蛋白表达,同时也抑制了TNF-α的分泌,较LPS组有显著差异.结论 LBP抑制肽通过抑制由CD14介导的LPS信号跨膜转导和TNF-α的分泌,对LPS所致疾病如脓毒血症、急性肺损伤可能有潜在的治疗作用.
关键词： 脂多糖结合蛋白抑制肽 脂多糖类 CD14 肿瘤坏死因子-α -
脂多糖结合蛋白抑制肽对脂多糖与内毒素血症小鼠肺泡巨噬细胞结合的影响
目的 研究脂多糖结合蛋白(LBP)抑制肽P12对脂多糖(LPS)与小鼠肺泡巨噬细胞(AMs)结合的抑制作用,探讨LBP抑制肽体内阻断内毒素信号传导通路的机制.方法 40只小鼠随机分为5组:对照组、内毒素血症组、低剂量P12组、中剂量P12组和高剂量P12组,每组8只.腹腔内注射LPS复制内毒素血症模型,尾静脉注射P12,流式细胞检测分析(FACS)异硫氰酸荧光素标记的LPS(FITC-LPS)与AMs的结合,以平均荧光强度(MFI)表示;ELISA法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量.结果 内毒素血症组小鼠AMs MFI明显高于对照组(45.31%比4.61%,P＜0.05);低剂量P12组、中剂量P12组和高剂量P12组的MFI分别为40.08%、30.76%和24.45%,低于内毒素血症组(低剂量组P＞0.05,中剂量P12组和高剂量组P均＜0.05).内毒素血症组小鼠血清中TNF-α的含量显著高于对照组[(180.17±39.14)pg/mL比(24.88±5.82)pg/mL,P＜0.01];低剂量P12组、中剂量P12组和高剂量P12组血清中TNF-α的含量分别为(112.69±19.78)pg/mL、(86.34±9.25)pg/mL和(70.48±8.48)pg/mL,均明显低于内毒素血症组(P均＜0.05).结论 LBP抑制肽P12抑制了LPS与内毒素血症小鼠AMs的结合,显著降低了LPS诱导的TNF-α的产生.
关键词： 内毒素血症 脂多糖结合蛋白抑制肽 脂多糖 肿瘤坏死因子α
