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蒺藜皂苷对人卵巢癌细胞SKOV3增殖的影响
目的 探讨蒺藜皂苷(STT)对体外培养的卵巢癌细胞株SKOV3增殖的影响及机制.方法 选择对数生长的卵巢癌细胞株SKOV3分为空白对照组,实验组加STr.采用MTr法检测细胞活性,流式细胞术(FCM)测定各组SKOV3肿瘤细胞凋亡率及细胞周期变化；应用免疫组化检测SKOV3 Bcl-2和Bax蛋白表达变化.结果 与对照组相比,实验组对卵巢癌细胞的增殖具有明显的抑制作用(P＜0.05).细胞周期分析显示,实验组使卵巢癌细胞的S期细胞比例减小,G1期细胞比例增大(P＜0.05).STr能够降低Bcl-2蛋白表达(P＜0.05),增加Bax蛋白表达(P＜0.01).结论 STT能明显抑制卵巢癌细胞的增殖,其机制可能与细胞周期发生停滞有关,并通过影响细胞周期及下调Bcl-2蛋白和增加Bax蛋白的表达而诱导细胞凋亡.
关键词： 蒺藜皂苷 卵巢癌细胞SKOV3 细胞增殖 -
缺氧诱导因子-1α过表达可使卵巢癌细胞株SKOV3的E-钙黏蛋白下调
目的探讨缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1 α)和E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)在人卵巢浆液性肿瘤细胞SKOV3缺氧不同时间的表达及其相互作用关系.方法在细胞缺氧培养不同时间段,分别采用Western blotting和RT-PCR技术检测HIF-1α和E-cad的蛋白和RNA表达变化;同时用HIF-1α抑制剂雷帕霉素作用于细胞,检测上述各指标的变化.结果随着缺氧时间的延长,HIF-1α蛋白表达逐渐上升,缺氧16 h达到高峰,24 h仍处于较高水平(P＜0.05),而HIF-1α的mRNA表达变化无明显改变(P＞0.05);E-cad缺氧8 h表达明显下降(P＜0.05),缺氧24 h表达仅为对照组的6.37%(P＜0.05);雷帕霉素可以从蛋白水平抑制HIF-1α表达,防止E-cad在缺氧环境中的降低.结论HIF-1α过表达可通过下调E-cad从而降低SKOV3细胞的黏附能力,由此可能启动肿瘤细胞从原发灶脱落继而转移的第一步.
关键词： 卵巢癌细胞SKOV3 缺氧 缺氧诱导因子-1α E-钙黏蛋白 -
七叶皂苷对卵巢癌细胞的杀伤及其药理学机制研究
目的:探讨七叶皂苷对人卵巢癌细胞SKOV3增殖与凋亡的影响及其药理学机制.方法:MTT法比较七叶皂苷处理组与对照组细胞增殖能力,同时采用实时荧光定量PCR、Western blott检测各组细胞中p53和Caspase3的表达情况,通过流式细胞术检测七叶皂苷对细胞凋亡的影响.结果:七叶皂苷能明显抑制卵巢癌细胞株SKOV3的增殖(P＜0.01),并随着浓度增大,抑制效果增强.实时荧光定量PCR、Western blott检测发现七叶皂苷处理能够促进细胞中p53和Caspase3的mRNA和Caspase3蛋白的表达(P＜0.01).流式细胞术结果显示七叶皂苷能诱导卵巢癌细胞株SKOV3凋亡(P＜0.01).结论:七叶皂苷能够抑制人卵巢癌细胞SKOV3的增殖,并诱导其凋亡.
关键词： 七叶皂苷 卵巢癌细胞SKOV3 增殖 凋亡 -
Galectin-9对卵巢癌细胞侵袭转移的影响
目的 探讨半乳糖凝集素-9(Galectin-9)对卵巢癌细胞侵袭转移的影响.方法 将不同浓度外源性Galectin-9[0(阴性对照)、4μg/mL、8μg/mL、16μg/mL]加入卵巢癌SKOV3细胞中,培养48 h,Western blot法检测细胞内Galectin-9的表达,MTT法检测细胞活力,Transwell法检测细胞迁移及侵袭能力,Western blot检测基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9、上皮间充质转化(EMT)相关蛋白E-钙粘蛋白(E-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)的表达.结果 与阴性对照比较,4μg/mL、8μg/mL、16μg/mL外源性Galectin-9能显著提高卵巢癌SKOV3细胞中Galectin-9的表达(P<0.01);4μg/mL、8μg/ml、16μg/mL外源性Galectin-9能显著降低SKOV3细胞活力[(100.00±7.46)vs(77.92±8.03)、(60.62±6.42)、(47.63±5.41)](P<0.01),减少细胞迁移[(99.49±9.63)vs(78.36±8.90)、(65.42±7.32)、(50.31±6.78)]及侵袭数目[(99.13±10.30)vs(76.69±7.23)、(63.68±6.32)、(52.37±4.99)](P<0.01),并能显著下调MMP2、MMP9及Vimentin的表达(P<0.01),上调E-cadherin的表达(P<0.01).结论 上调卵巢癌细胞SKOV3中Galectin-9的表达能显著抑制细胞迁移侵袭等恶性生物学行为,可能与下调MMPs及调节EMT相关蛋白表达有关.
关键词： 半乳糖凝集素-9 卵巢癌细胞SKOV3 侵袭 转移 -
THY1基因真核表达质粒的构建及其对卵巢癌细胞SKOV3生长的影响
构建THY1真核表达质粒并转染卵巢癌细胞SKOV3,探讨其对SKOV3细胞生长的影响.通过目的基因克隆,构建pcDNA3.1(+)-THY1质粒并转染SKOV3细胞,实验分3组:重组质粒转染组(SKOV3-THY1)、空质粒转染组(SKOV3-Null)和未转染组(SKOV3).RT-PCR和免疫细胞化学方法鉴定THY1表达情况;MTT和流式细胞术检测THY1对SKOV3细胞增殖及周期的影响.DNA测序证实THY1正确插入pcDNA3.1(+)中,并整合于SKOV3细胞;SKOV3-THY1组的细胞抑制率明显高于SKOV3-Null组;且其G1期细胞比例明显高于另两组.结论:S期细胞比例明显低于另两组.结论:成功构建THY1真核表达质粒,该质粒可抑制SKOV3细胞生长.
关键词： 基因 THY1 真核表达质粒 卵巢癌细胞SKOV3 -
内皮祖细胞对卵巢癌细胞SKOV3生物学功能的影响
目的:通过在卵巢癌细胞SKOV3中使用血管内皮生长因子(VEGF)抗体贝伐单抗,了解脐血内皮祖细胞(EPCs)对卵巢癌细胞SKOV3增殖、迁移、黏附和凋亡能力的影响.方法:在成功建立EPCs和卵巢癌细胞SKOV3体外培育模型后,将实验分为SKOV3单独培养组(SKOV3组),SKOV3+EPCs共培养组(SKOV3+EPCs组),SKOV3+100 μg/ml的贝伐单抗共培养组(SKOV3+贝伐单抗组)和SKOV3+EPCs+ 100 μg/ml的贝伐单抗共培养组(SKOV3+EPCs+贝伐单抗组),并比较4组SKOV3的增殖、凋亡、迁移和黏附能力的变化.结果:①SKOV3+EPCs组SKOV3的增殖能力、穿膜细胞数和OD值高于SKOV3组(P＜0.05,P＜0.01);②SKOV3+贝伐单抗组SKOV3的增殖能力、穿膜细胞数、凋亡率低于SKOV3组(P ＜0.05,P＜0.01);③SK-OV3+EPCs+贝伐单抗组SKOV3的增殖活性、穿膜细胞数、凋亡率低于SKOV3+EPCs组(P＜0.05,P＜0.01),而OD值显著高于SKOV3+EPCs组(P＜0.01).结论:共培养条件下EPCs能促进SKOV3生物学功能,贝伐单抗则相反,EPCs能协同贝伐单抗抑制SKOV3的生物学功能.
关键词： 内皮祖细胞 卵巢癌细胞SKOV3 贝伐单抗 体外 -
shSASH1基因对卵巢癌细胞SKOV3生物学功能的影响
目的 探讨SASH1对卵巢癌细胞SKOV3的增殖、凋亡与侵袭方面的影响.方法 标本组织来源于妇产科手术收集的50例卵巢癌组织.通过建立重组质粒pcDNA3.1-SASH1,并借助于脂质体2000转染到SKOV3,采用流式细胞计(FCM)分析实验和细胞侵袭实验,来探索SASH1对卵巢癌细胞SKOV3在细胞扩散、凋亡和侵袭中的影响.结果 pcDNA3.1-SASH1转染组中的s期细胞分值(％)低于正常(未转染的)对照组(x2=26.78,P＜0.01)或空载组(pcDNA3.1) (x2=25.12,P＜0.01).与空载组和正常(未转染的)对照组相比,pcDNA3.1-SASH1转染组中的SKOV3明显降低了癌细胞的生长、增殖和侵袭的能力(x2=31.25,P＜0.01),然而在空载组和正常(未转染的)对照组中没有明显的差异;pcDNA3.1-SASH1细胞组显示更多的凋亡细胞(x2=36.58,P＜0.01).结论 SASH1可抑制卵巢癌细胞SKOV3的生长、增殖和侵袭能力,并促进其凋亡.
关键词： SASH1基因 卵巢癌细胞SKOV3 增殖 凋亡 侵袭
