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山茱萸佳配伍组分对高糖致ECV304细胞培养液中NO和ET含量的影响
目的:探讨山茱萸佳配伍组分对内皮细胞NO和ET的影响,分析其对糖尿病血管病变的保护作用及作用机理.方法:本实验前期研究结果表明,山茱萸防治糖尿病血管病变的佳有效部位组合为:环烯醚萜苷+三萜酸+1 W～6 W分子多糖(比例2:1:2)用A2B1C2 Ⅰ表示.体外培养细胞,在细胞板内加入含30 mm高糖的10%FBS RPMI-1640培养液,加入空白、A2B1C2 Ⅰ小剂量、大剂量含药血清.同时设10%FBS RPMI-1640培养液作正常对照,川芎嗪、黄芪注射液作阳性对照.在37℃、5%CO2饱和湿度培养48 h后,取细胞上清液测定ET和NO.结果:高糖组细胞上清液中NO水平降低,ET明显升高(P＜0.01),提示血管内皮细胞受损.而山茱萸佳配伍组分能提高NO含量,降低ET含量,与高糖组比较有显著性差异(P＜0.05,0.01).结论:山茱萸佳配伍组分A2B1C2 Ⅰ可部分恢复NO和ET的动态平衡,对糖尿病血管病变有一定的保护作用.
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山茱萸佳配伍组分对高糖致ECV304细胞氧化损伤的保护作用
目的 研究山茱萸佳配伍组分(环烯醚萜苷、三萜酸和多糖以2:1:2配伍)对高糖培养的内皮细胞(human umbilical vein endothelium cells,ECV304)氧化应激的影响.方法 体外培养细胞,在细胞板内加入含30 mmol·L-1高糖的10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS) RPMI 1640培养液,加入空白、山茱萸佳配伍组分大剂量、小剂量含药血清.同时设10% FBS RPMI 1640培养液作正常对照,川芎嗪作阳性对照.在37℃、5% CO2饱和湿度培养48 h后,取细胞上清液测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px).应用激光共聚焦显微镜检测进入细胞内2′,7′-二氯荧光黄双乙酸酯(DCFH-DA)荧光强度来反映细胞内ROS含量.结果 高糖组细胞上清液中SOD、GSH-Px活性降低,MDA、ROS含量增加(P<0.01),提示血管内皮细胞受损,抗氧化能力降低.而山茱萸佳配伍组分能提高SOD、GSH-Px活力,降低ROS、MDA含量,与高糖组比较差异有显著性(P<0.05,0.01).结论 山茱萸佳配伍组分能够保护血管内皮细胞,具有防治糖尿病血管病变的作用,其作用机制与抑制氧化应激有关.
