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JMJD2B在人卵巢癌中的定位表达
目的:研究JMJD2B在人卵巢癌细胞株SKOV3中的定位和表达.方法:人卵巢癌细胞株SKOV3进行核浆分离,蛋白免疫印迹法检测细胞核和细胞浆中JMJD2B表达,PARP为细胞核标志物,β-tubulin为细胞浆标志物.激光共聚焦扫描显微镜检测内源JMJD2B在SKOV3细胞中的定位.结果:核浆分离的蛋白免疫印迹和激光共聚焦扫描纤维镜证实JM-JD2B主要定位于细胞核内,细胞浆仅有少量表达.结论:JMJD2B主要定位于卵巢癌细胞株SKOV3核内,可能是参与肿瘤细胞基因转录调控和蛋白表达的重要蛋白之一.
关键词： JMJD2B 蛋白免疫印迹 激光共聚焦扫描显微镜 定位 -
组蛋白去甲基化酶 JMJD2B 在肾透明细胞癌和膀胱尿路上皮癌中的表达
目的 探讨组蛋白去甲基化酶JMJD2B在肾透明细胞癌和膀胱尿路上皮癌的表达.方法 病理确诊肾透明细胞癌患者 30例 ,膀胱尿路上皮癌患者10例.采用免疫组化法检测JMJD2B在人肾透明细胞癌和膀胱尿路上皮癌及其癌旁组织的表达.结果 JMJD2B主要定位于肾透明细胞癌的细胞核中.其在高分化及中分化的肾透明细胞癌组织中呈现弱阳性表达 ,其阳性表达细胞数仅占10% ;但在低分化肾透明细胞癌组织中却表达较少.膀胱尿路上皮癌及其癌旁组织中均无明显JMJD2B表达.结论 JMJD2B在高分化及中分化的肾癌组织中呈现弱阳性表达 ,在膀胱尿路上皮癌中未见JMJD2B表达.其在肾癌发生、发展中的意义值得进一步研究.
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罗勒多糖对肝癌细胞缺氧模型组蛋白去甲基化酶LSD1、JMJD2B及JARID1B表达的影响
目的 研究罗勒多糖对肝癌细胞MHCC97H和MHCC97L缺氧模型组蛋白去甲基化酶LSD1、JMJD2B及JARID1B表达的影响,探讨罗勒多糖抗肿瘤侵袭转移作用与表观遗传修饰的关系.方法 采用二氯化钴诱导肝癌细胞缺氧,建立肝癌细胞MHCC97H和MHCC97L体外缺氧模型,通过不同剂量罗勒多糖干预24h,细胞划痕实验检测缺氧条件下肝癌细胞的迁移能力,实时荧光定量PCR法检测各组肝癌细胞中HIF-1α、LSD1、JMJD2B及JARID1B mRNA表达水平,Western-blot法检测各组肝癌细胞中HIF-1α、LSD1、JMJD2B及JARID1B蛋白表达情况.结果 罗勒多糖能抑制缺氧条件下MH-CC97H和MHCC97L细胞的迁移能力,下调细胞中HIF-1α mRNA及蛋白的表达水平,与缺氧模型组相比有显著性差异(P＜0.05);罗勒多糖能够下调MHCC97H细胞缺氧条件下LSD1、JMJD2B、JARID1B mRNA和蛋白的表达,与缺氧模型组相比有显著性差异(P＜0.05);缺氧条件下MHCC97L细胞中LSD1、JMJD2B、JARID1B mRNA和蛋白的表达与正常对照组无显著性差别(P＞0.05),罗勒多糖对这三种酶的表达亦无显著作用.结论 罗勒多糖能改善不同转移潜能肝癌细胞MHCC97H和MHCC97L的缺氧微环境,抑制肿瘤细胞的侵袭转移.其中罗勒多糖对高转移潜能肝癌细胞MHCC97H的抗侵袭转移作用与其对细胞中组蛋白去甲基化酶LSD1、JMJD2B、JARID1B的调节有关,而对低转移潜能肝癌细胞MH-CC97L侵袭转移能力的调节未发现与LSD1、JMJD2B、JARID1B有明显关系.
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JMJD2B对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株生物学行为的影响
目的 探讨组蛋白去甲基化酶JMJD2B(Jumonji domain-containing protein 2B)小干扰RNA(siRNA)对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株生物学行为的影响.方法 采用免疫组化和细胞免疫荧光的方法检测JMJD2B在人皮肤鳞状细胞癌组织和A431细胞中的表达,转染JMJD2B siRNA至A431细胞株,分别采用CCK-8、克隆形成实验、流式细胞仪、Transwell法检测细胞增殖、克隆、周期分布、凋亡、迁移及侵袭情况.结果 JMJD2B在肿瘤组织中的表达高于正常皮肤.与未转染组和转染对照组比较,JMJD2B siRNA转染组增殖、克隆、迁移及侵袭能力显著受抑,肿瘤细胞发生G1期阻滞,细胞凋亡比例增加(P＜0.05).结论 JMJD2B在人皮肤鳞状细胞癌中呈高表达,JMJD2B siRNA能促进A431细胞的凋亡,同时也抑制了肿瘤细胞的增殖、克隆、迁移以及侵袭的能力.
