首页 > 文献资料
-
基于PCR-DGGE技术分析中老年人肠道菌群结构与免疫功能的关系
目的 通过检测中老年人的各项免疫指标和肠道菌群组成,分析中老年人免疫功能与其肠道菌群结构的关系,探索高龄引起的肠道菌群结构变化对中老年人免疫功能可能的影响.方法 选取50～75周岁,健康中老年人99人作为研究对象,抽取空腹静脉血,检测CD3+T细胞数、CD4+T细胞数、CD8+T细胞数及血清中的IgA、IgM、IgG.收集各研究对象的粪便,提取粪便细菌基因组DNA,采用细菌16SrRNA V6～V8区通用引物进行PCR扩增,对扩增产物进行变性梯度凝胶电泳.采用聚类分析、主成分分析、方差分析等解析研究对象肠道菌群结构特征及与其免疫指标的相关性.结果 研究对象肠道菌群组成表现出高度多态性和显著的个体差异,CD3+T细胞和CD4+/CD8+水平与肠道菌群结构有相关性,CD4 +/CD8+偏高的人群与CD4+/CD8+偏低和正常人群相比肠道菌群丰富度(S)偏低,但是未观察到IgA、IgM、IgG与肠道菌群结构存在明显相关.结论 中老年人肠道菌群结构与免疫水平相关,肠道菌群多样性的减少可能会影响其机体CD8+T细胞为中心的非特异性自然免疫功能.
关键词： 中老年人 肠道菌群 聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳 免疫 -
水溶性壳聚糖对小鼠肠道菌群的影响
目的 应用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术研究水溶性壳聚糖对正常小鼠肠道菌群的影响.方法 使用SPF级昆明小鼠18只,随机分为3组,每组6只,依次为正常对照组(NC)、水溶性壳聚糖高(WSC-H)和低浓度组(WSC-L),灌服对应药物30 d后收取鼠便,细菌基因组DNA提取,PCR-DGGE电泳得到肠道菌群图谱,计算菌群结构多样性指数,聚类分析相似性并鉴定优势条带序列.结果 水溶性壳聚糖处理后小鼠肠道菌群结构发生改变,多样性指数、丰富度和均匀度较低,乳杆菌成为肠道中的优势菌型.结论 水溶性壳聚糖能够增加肠道中乳杆菌的种类和数量,起到益生元的作用来调节肠道微生态平衡.
关键词： 水溶性壳聚糖 肠道菌群 聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳 -
Alzheimer's病与神经型尼古丁胆碱能受体α4基因多态性关联研究
目的 探讨Alzheimer's 病(AD)与神经型尼古丁胆碱能受体α4亚单位(CHRNA4)基因所有外显子基因多态性的关联关系.方法 用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)和DNA测序技术分析23例AD病人及30例正常人的CHRNA4基因所有外显子基因序列.结果 CHRNA4的外显子3上发现3个新的多态性位点,这3个多态位点在病例组与对照组之间存在差异显著性.CHRNA4的外显子5上发现3个多态性位点,病例组与对照组之间没有差异.CHRNA4的外显子6上发现7个多态性位点,病例组与对照组之间没有差异.结论 在CHRNA4外显子3上发现的3个新的多态性位点与AD发病可能存在相关关系.因此 CHRNA4基因外显子3多态性可能与AD发病有关联.
-
盐酸林可霉素与头孢拉定对BALB/c小鼠肠道菌群影响的比较研究
目的:比较盐酸林可霉素(LIH)与头孢拉定(CED)对BALB/c小鼠肠道茵群的影响.方法:将BALB/c小鼠随机分为LIH (330 mg·kg-1)组和CED(165 mg·kg-1)组,每组10只,分别灌服相应药物10d,停药7d,应用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术,对给药前和给药3、10d以及停药7d后2组小鼠粪便中的肠道菌群进行相似性、多样性分析及优势条带的序列分析.结果:2组给药前和停药7d后的肠道菌群结构相似,给药3、10d的肠道菌群结构相似,但2组给药前后茵群结构差异较大.实验期间2组肠道菌群均分为4个菌簇,其中LIH组给药前粪便标本中Clostridium carboxidivorans是定植菌,给药3d后卟啉单胞茵成为定植菌,Clostridium carboxidivorans消失;CED组给药前和给药3d的粪便标本中Clostridium carboxidivorans是定植茵,给药10d后卟啉单胞茵成为定植茵,Clostridium carboxidivorans消失;另2个茵簇在2组给药前后均变化不大.结论:2种药均可杀灭肠道中的定植茵Clostridium carboxidivorans,并在用药过程中产生致病茵卟啉单胞菌,导致肠道菌群失调.
关键词： 盐酸林可霉素 头孢拉定 聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳 小鼠 肠道茵群 -
人颊黏膜微生物群落年龄相关性演替研究
目的：初步探讨健康人群颊黏膜菌群组成在不同年龄及牙列阶段的动态演替过程。方法25例健康受试者根据年龄及牙列情况分为5组：乳牙列组、混合牙列组、青少年组、青年组及老年组；分别提取各样本的细菌总DNA进行聚合酶链式反应，采用QuantityOne软件对扩增产物的变性梯度凝胶电泳（DGGE）指纹图谱进行生物信息学分析。结果1）颊黏膜菌群的组成具有个体差异性。2）乳牙列组、混合牙列组、青少年组、青年组及老年组DGGE指纹图谱的平均条带数分别为21.2±4.0、17.8±3.9、15.8±4.3、16.8±3.7、22.2±6.5，各组间的差异无统计学意义（P>0.05），提示颊黏膜优势菌群的数量在各个年龄阶段保持相对稳定。3）5组的Shannon指数分别为1.73±0.2、1.43±0.1、1.05±0.2、1.45±0.2和1.63±0.3，各组间的差异有统计学意义（P=0.003）；提示颊黏膜微生物的多样性在儿童至青少年阶段呈下降趋势，在青年至老年阶段呈上升趋势。4）群落结构相似性聚类分析发现：同组内大部分样本聚类位置相近，群落结构表现出较高的相似性；不同组的大部分样本未聚类在一起，群落结构呈现出一定的差异性。结论不同年龄组健康人群的颊黏膜微生物群落组成存在差异，青少年期可能是颊黏膜微生物多样性改变的重要转折点。
关键词： 颊黏膜微生物群落 微生物群落多样性 年龄 演替 聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳
