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低氧环境下白细胞介素1β诱导中脑源性神经干细胞的分化
背景:在体外某些外来信号的调控和诱导下,神经干细胞可定向诱导分化成与受体部位细胞类型与构成相似的细胞群体,使其更容易掺入靶组织,并可满足移植所需的细胞数量,提高移植细胞的存活率.目的:验证白细胞介素1β在低氧环境下体外诱导中脑源性神经干细胞的分化.方法:分离孕12 d胎鼠中脑组织,培养神经干细胞、传代并鉴定.将鉴定后传代培养的中脑源性神经干细胞按分组接种于含体积分数10％胎牛血清的DMEM/F12培养基和含体积分数10％胎牛血清的DMEM/F12+白细胞介素1β培养基;分别置于常氧(体积分数21％O2)和低氧(体积分数3％O2)环境下诱导分化,诱导分化9-11 d后行小鼠抗大鼠酪氨酸羟化酶免疫细胞化学染色,检测酪氨酸羟化酶及神经元特异性烯醇化酶阳性细胞率.结果与结论:与常氧组比较,低氧组尤其是低氧+白细胞介素1β组中酪氨酸羟化酶阳性神经元的突起数目更多,且长度更为延长.孕12d胚鼠腹侧中脑组织可以在体外培养传代、并能诱导分化成多巴胺能神经元；在低氧环境或低氧+白细胞介素1β诱导下,分化率均高于常氧组,其表型更成熟.说明在低氧或低氧和白细胞介素1β诱导下,可明显促进中脑源性干细胞分化为形态及功能成熟的多巴胺能神经元.
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常氧与低氧环境下白细胞介素-1β体外诱导鼠胚中脑神经干细胞向多巴胺能神经元的分化
目的:探讨白细胞介素-1β(IL-1β)在低氧环境下体外诱导中脑源性神经干细胞的分化.方法:分离孕12 d胎鼠中脑组织,制成单细胞悬液,先在无血清培养条件下做原代和传代培养；对原代和传代培养分化细胞分别行免疫细胞化学显色鉴定.鉴定后,传代培养的中脑源性神经干细胞按组接种于含10％ FBS的DMEM/F12培养基和含10％FBS的DMEM/F12+IL-1β培养基；分别置于常氧(21％ O2)和低氧(3％O2)环境下诱导分化,诱导9～11 d后行小鼠抗大鼠TH免疫细胞化学显色,并行流式细胞术检测酪氨酸羟化酶(TH)及烯醇化酶(NSE)阳性细胞率.结果:各实验组中,常氧组(对照组)、常氧+IL-Iβ组、低氧组、低氧+IL-1β组TH阳性神经元分别为3.63±0.76、11.76±0.54、15.83±1.15、23.87±1.83;NSE阳性神经元分别为19.82±0.65、29.33±0.84、41.62±1.51和60.35±1.56.各组与对照组比较,差异均有统计学意义.结论:孕12 d胚鼠腹侧中脑组织可以在体外培养传代、并能诱导分化成多巴胺能神经元；在低氧环境或低氧+IL-1β诱导下,分化率均高于常氧组,其表型更成熟.说明在低氧或低氧+IL-1β诱导下,可明显促进中脑源性干细胞分化为形态及功能成熟的多巴胺能神经元.
