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杂色曲霉素致人胚肺细胞p53及Ki-ras基因突变研究
为探讨中国恶性肿瘤高发区粮食中优势污染霉菌毒素-杂色曲霉素(Sterigmatocystin,ST)的致癌作用,运用银染PCR-SSCP方法分析了不同浓度的ST(1μg/ml和3μg/ml)对体外培养的人胚肺细胞恶性转化过程中抑癌基因p53第5、6、7、8外显子及癌基因Ki-ras的突变情况.结果显示ST处理后第22周,人胚肺成纤维细胞p53基因的第8外显子和Ki-ras癌基因均出现异常泳动带型,表明ST诱发了抑癌基因p53及癌基因Ki-ras突变,进一步证实了ST对人肺组织的致癌作用.
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环磷酰胺诱导永生化人支气管上皮细胞恶性转化过程中的基因突变
环磷酰胺(CP)是国际癌症研究署确认的人类I组致癌原,目前缺乏适宜的人类细胞模型开展致癌相关的细胞和分子机理的研究. 本室已经进行了CP诱导永生化人支气管上皮细胞(BEAS-2B)恶性转化的工作,建立了CP的癌前转化细胞(BEAS-CP),以此为细胞模型,本实验运用聚合酶链式反应单链构象多态性和序列分析的方法进行了细胞转化进程中基因突变的动态分析. 分别关注了p53基因第5～8, p16基因第1～2和ki-ras基因第1外显子的突变情况. 研究结果表明:BEAS-CP细胞存在p16基因第1外显子多位点和ras基因第1外显子单位点的碱基突变,晚代龄的转化细胞没有测到p53基因的突变. 综上实验结果认为:p16基因突变可能与BEAS-CP细胞周期的增殖性改变有关,ki-ras基因的突变则可能具有转化启动效应,两者都是细胞转化过程中的重要分子事件.
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小鼠胚胎发育中期肺细胞增殖与凋亡的研究
目的探讨小鼠胚胎中期肺发育过程细胞增殖与凋亡的变化规律及相关基因p21、ki-ras在肺发育中的表达意义.方法采用免疫组织化学及切口末端标记法(TUNEL),观察小鼠肺发育过程中的细胞增殖与凋亡.用原位杂交的方法检测p21、ki-ras在胚胎肺发育中期的表达.结果肺组织在第12天细胞增殖的表达较强,而到第13天、第14天的细胞增殖趋于稳定.p21、ki-ras基因的表达主要在肺上皮细胞,随胎龄增长而表达颜色加深.结论胚胎发育中期细胞增殖与凋亡相伴存在.p21、ki-ras基因在胚胎肺发育中期有表达,说明这两个细胞周期调控基因在胚胎肺发育中期起一定的作用.
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小鼠胚胎发育中期肠细胞增殖与凋亡的研究
背景与目的: 探讨小鼠胚胎中期肠发育过程细胞增殖与凋亡的变化规律及相关基因P21、Ki-ras在肠发育中的表达意义. 材料与方法: 对胚胎中期的小鼠肠组织,采用免疫组织化学及切口末端标记法(TUNEL),观察小鼠肠发育过程中的细胞增殖与凋亡.用原位杂交的方法检测P21、Ki-ras在胚胎肠发育中期的表达. 结果: 肠组织在E12d有一个较大的增长,而到E13d、E14d的生长趋于稳定.P21、Ki-ras基因的表达主要在肠上皮细胞,随胎龄增长而表达颜色加深. 结论: 胚胎发育中期细胞增殖与凋亡相伴存在.P21、Ki-ras基因在胚胎肠发育中期有表达,说明这两个细胞周期调控基因在胚胎肠发育中期起一定的作用.
