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探讨孕妇HBV-DNA定量对监测母体HBV传播价值
目的 乙型病毒性肝炎是目前已确认的病毒性肝炎中对人类健康危害为严重的一种肝炎.方法 采用荧光定量PCR技术对122例乙肝血清标志阳性的孕妇及其婴儿血清进行HBV-DNA定量检测,分析母婴血清中含HBV-DNA的数量存在的相关性.结果 在41例"大三阳"的孕妇组中,患者的血清中的HBV-DNA所含的数量在6.00-9.90之间,测的的平均值是7.57±1.27,母婴传播率为82.9%;"小三阳"组孕妇65例,血清HBV-DNA含量范围为<2.00-4.71,均值为413±1.64,母婴传播率为52.3%;在14例单一的HBcAb阳性的孕妇组中,患者的血清中含有的HBV-DNA的数量的范围小于2.00-4.71,测的平均值是3.17±1.54,母婴传播率为12.5%,HBV母婴宫内传播率随孕妇血清HBV-DNA含量的增高而增加.结论 母婴乙型肝炎病毒宫内传播率与孕妇血清中HBV-DNA含量呈正相关性(r=0.351,p<0.01),当孕妇血清中HBV-DNA含量>6.00时,乙型肝炎病毒母婴宫内传播率显著增加(增加47.5%),提示有效控制患乙肝孕妇血清中HBV-DNA含量,可明显减少宫内母婴乙肝病毒传播率.
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孕妇HBV-DNA定量与母婴垂直传播的临床观察
目的：探讨HBV-DNA定量与孕妇母婴阻断后的HBV宫内感染的临床观察。方法：将286例HBsAg阳性孕妇分为研究组143例，其中乙肝大三阳46例，乙肝小三阳45例，HBsAg阳性者52例，HBV-DNA定量均高于正常值或几倍不等；对照组143例，其中乙肝大三阳47例，乙肝小三阳50例，HBsAg阳性者46例，HBV-DNA定量均在正常范围内。两组均于孕28、32、36周分别肌注HBIG 200 IU，采用酶联免疫吸附试验检测两组新生儿的五项指标。结果：研究组、对照组新生儿脐血检测结果HBsAg阳性率分别为34.2%、11.2%，两组比较差异有统计学意义(P<0.05)；两组大三阳性率分别为10.9%、12.8%，两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论：HBV-DNA含量均在正常范围内，HBIG能够有效阻断HBsAg阳性和乙肝小三阳的母婴传播，但不能阻断乙肝大三阳和HBV-DNA定量异常的乙肝小三阳和HBsAg阳性患者的母婴传播。
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乙肝血清学标志物与HBV-DNA含量检测的临床意义
乙肝血清学标志物检测已从酶联免疫吸附法定性试验发展到时间分辨荧光免疫分析定量分析,为临床判断患者的病情、传染性和疗效提供重要的依据.本研究采用酶联免疫吸附法(ELISA)、时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)、荧光定量法PCR(FQ-PCR)分别检测492例乙肝患者血清学标志物与HBV-DNA含量,探讨三者的关系和临床意义,现报告如下.
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乙肝五项定性与HBV-DNA结果相关探讨
目的：探讨ELISA检测乙肝病毒血清标志物与荧光定量PCR检测HBV-DNA结果的相关性。方法：采用ELISA方法检测285例患者乙肝病毒血清标志物(HBV-M)，同时用荧光定量PCR检测其HBV-DNA含量。结果：139例HBsAg (+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+)患者中有124例患者阳性(血清HBV-DNA含量≥103copy/ml为阳性),阳性率为89.2%；92例HBsAg(+)、HBeAb(+)、抗-HBc(+)患者中有43例阳性,阳性率为46.7%；27例HBsAg(+)、抗-HBc(+)患者中有10例性,阳性率为37%；10例HBsAg(+)、HBeAg(+)患者中有9例阳性,阳性率为90%；11例HBsAg(+)、HBeAg(±)、抗-HBc(+)患者中有9例阳性,阳性率81.8%，6例单独HBsAg(+)患者中有0例阳性,阳性率为0。结论：所有分组中HBeAg(+)组病毒复制水平高，其与HBV-DNA含量密切相关；抗-HBe(+)、抗-HBc(+)患者乙肝病毒复制并非完全停止，只是其复制水平明显降低，荧光定量PCR检测HBV-DNA含量可表达HBV感染和病毒复制水平。
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HA、LN、CⅣ、PCⅢ与HBV-DNA含量联合检测在肝纤维化诊断中的临床意义
目的探讨血清四项肝纤维化指标透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CIV)和Ⅲ型前胶原(PCⅢ)在肝纤维化非创伤性检查中的临床意义,同时初步观察四项肝纤指标与乙肝病毒(HBVDNA)复制指标之间的关系.方法100例肝病患者血清中HA、LN、CⅣ、PCⅢ检测用放免法(RIA);对其中88例乙肝患者血清HBVDNA含量及乙肝病毒标志物(HBVM)分别用荧光定量PCR(FQ-PCR)及酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测,并进行比较分析.结果四项肝纤指标在急性肝炎和慢性肝炎轻度、中度、重度者及慢性重型肝炎中有依次升高趋势,差异有显著性(P＜0.05),而肝硬化组与慢性重型肝炎组比较,HA、PCⅢ两项略低,而LN、CⅣ明显升高(P＜0.05).同时在乙肝病毒标志物HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)、HBV-DNA阳性组中血清四项肝纤指标低,而在HBsAg(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)、HBV-DNA阴性组中高,两者之间有显著差异(P＜0.01).结论四项肝纤指标联合检测对肝病肝纤维化的临床诊断、治疗提供了准确可靠的依据.同时慢性乙肝患者血清肝纤指标与HBVDNA含量密切相关,这对临床判断肝纤维化程度和指导抗纤维化及抗病毒治疗有着重要的价值.
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定量检测乙肝患者血清HBV标志物的相关性分析
目的:探讨HBV-M与HBVDNA含量的关系,分析其临床意义,以便合理地使用检测乙肝血清标志物.方法:采用免疫荧光法检测HBV-M定量,用荧光定量PCR方法检测HBV-DNA含量.结果:HBeAg阳性患者,HBV-DNA检出率94.07%(127/135),明显高于HBeAg阴性组77.07%(158/205),P＜0.01.HBeAg＞0.9NCU/mL组患者HBV-DNA含量(6.5±1.3)明显高于HBeAg0.03～0.9NCU/ml组含量(6.12±1.4).HBsAg含量与HBeAg含量密切相关,并与HBV-DNA含量有关,P＜0.01.HBV-DNA＞105cps/L组HBeAg含量明显高于HBV-DNA＜105cps/mL组P＜0.01. 结论:血清中HBsAg含量与HBeAg含量有关,HBeAg含量与HBV-DNA含量密切相关.
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乙肝患者血清HBV-DNA含量与性激素水平的相关关系
目的:探讨性激素对乙肝患者病毒含量的影响及二者的相关关系.方法: 采用PCR核酸扩增酶免定量技术进行血清HBV-DNA含量,放射免疫法检测性激素含量.[ HT5”H〗结果:男性乙肝患者HBV-DNA含量与血清睾酮(T)呈显著正相关(r ＝0.52,P＜0.001),与雌二醇(E2)、孕酮(P)呈显著负相关(r＝ -0.65,r＝-0.81,均P＜0.001),女性患者HBV-DNA含量与性激素无显著相关关系.结论:性激素对男性患者HBV-DNA含量有调节作用,可以通过调整性激素平衡来控制人体HBV感染.
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慢性乙型肝炎病变活动与血清HBV-DNA含量的关系
目的:探讨慢性乙型肝炎患者HBV-DNA基因含量与乙型肝炎病情反复发作的关系.方法:用实时荧光定时PCR法测定慢性乙肝患者活动期和稳定期血清中HBV-DNA含量,统计分析HBV-DNA含量与病情活动的关系.结果:慢性乙肝病情反复发作HBV-DNA含量密切相关,但HBV-DNA含量的高底与ALT、AST水平无关.结论:乙肝病毒复制的增加,导致病毒抗原的产生和累积,引起继发性的免疫损害,是慢性乙肝病情反复的主要原因.
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血清HBV-DNA定量检测与凝血指标对乙肝患者病情诊断的研究
目的 研究乙型肝炎患者凝血功能、临床分型及血清乙肝病毒核糖核酸(HBV-DNA)含量之间的关系.方法 收集乙型肝炎患者472例为研究组,健康人群55例作为健康对照组,分别检测凝血功能指标及血清HBV-DNA含量,比较临床分型各组的PT、INR、APTT、TT和FIB的关系以及不同血清HBV-DNA含量组中PT、INR、APTT、TT和FIB的关系.结果 男性的FIB(2.31±0.90)明显小于女性FIB(2.67±1.50)(P＜0.05).慢性乙肝(轻型)组和慢性乙肝(中型)组的PT、APTT、TT均明显低于慢性乙肝(重型)、肝炎肝硬化(未失代偿)、肝硬化失代偿期组的PT(P＜0.01).男性与女性对照组的FIB均明显高于急性肝炎组以及慢性乙肝(重型)、肝炎肝硬化(未失代偿)、肝硬化失代偿期组(P＜0. 01).按血清HBV-DNA定量分组患者APTT、TT、FIB值与正常对照组和乙肝患者HBV-DNA含量＜103 copy/mL组比较均有显著性差异(P＜0.01).当103copy/mL＜HBV-DNA＜105 copy/mL时,PT值与正常对照组比较具有显著性差异,血清中HBV-DNA含量分组与PT有正相关性(r=0.159,P=0.000),HBV-DNA含量与FIB呈负相关(r=-0.144,p=0.001).结论 乙肝患者凝血功能异常程度随临床分型的加重而加重,凝血功能的异常随着血清HBV-DNA含量的增加有降低的趋势,PT值的检测是反映乙肝患者凝血功能的灵敏指标.对于HBV-DNA含量在105～106 copy/mL的患者,应该随时监测凝血功能,把握抗病毒治疗的时机.
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SYBR Green Ⅰ联合TaqMan荧光定量PCR检测HBV-DNA的意义
目的 探索SYBR Green Ⅰ联合TaqMan荧光定量PCR检测HBV-DNA的意义.方法 选择浓度为108.48、105.70和103.70 copies/ml的3种HBV-DNA阳性血清和＜1×103.0 copies/ml的阴性血清各1份,在TaqManPCR混合反应体系中加入SYBR Green Ⅰ组成双荧光PCR(TaqMan+SYBR Green Ⅰ组),同时进行TaqMan和SYBR Green Ⅰ的单荧光PCR(分别为TaqMan组和SYBR Green I组),设置同一PCR和熔解曲线的循环参数,检测HBV-DNA含量及其Tm,每种方法一次检测每份血清5次.结果 TaqMan+SYBR Green Ⅰ组检测的HBV-DNA阳性血清均为阳性,其平均含量为108.55±0.32、105.79±0.29、103.810.30,与TaqMan组的108.49±0.31、105.69±0.30、103.72±0.25 copies/ml 对应浓度值取10对数比较,无统计学意义(t=0.31、0.54和0.27,P＞0.05);与SYBR Green Ⅰ组的108.41±0.35、105.21±0.34和103.26±0.26 copies/ml(不含未检出的两次血清)比较,除高浓度外,中低浓度有统计学意义(t=2.90和2.62,P＜0.05).TaqMan+SYBR Green Ⅰ组和SYBR Green Ⅰ组阳性血清均出现明显熔解曲线,熔解温度(Tm)分别为71.8℃、72℃和79.8℃,阴性血清未出现扩增曲线和Tm值.结论 SYBR Green Ⅰ联合TaqMan-PCR检测HBV-DNA时,具有能维持TaqMan-PCR的高灵敏度、特异性更强,并能同时检测HBV-DNA Tm的特点,为HBV的DNA多态性分析,尤其是在HBV基因分型方面提供了新的检测思路.
关键词： SYBR Green Ⅰ TaqMan探针 定量PCR HBV-DNA含量 TM -
血清HBV-DNA含量及乙型肝炎标志物模式与肝炎后肝硬化的关系
目的 探讨血清中HBV-DNA含量及乙型肝炎(下称乙肝)标志物模式与乙肝后肝硬化的关系,为临床提供降低发病率的方法.方法 收集肝硬化患者的血清检测其HBV-DNA含量及乙肝两对半指标,并按照两对半指标的模式进行分组,同时设对照组.结果 在58例乙肝后肝硬化患者中共检出"大三阳"、"小三阳"及HBsAg
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HBV-DNA阳性乙肝孕妇自然病程下不同孕期病毒载量的动态变化及临床意义
目的 探讨HBV-DNA阳性慢性乙型肝炎(CHB)孕妇自然病程下不同孕期乙型肝炎病毒(hepatitisB Virus,HBV)载量的动态变化及与肝功能指标的相关性.方法 收集27例HBV-DNA阳性的CHB孕妇作为研究对象,分别在孕早期(T1期)、孕中期(T2期)、孕晚期(T3期)采血,用荧光定量PCR (FQ-PCR)法检测血清HBV-DNA含量;用全自动生化仪检测肝功能相关指标;电化学发光法检测“乙肝两对半”血清标志物指标.采用SPSS13.0统计软件进行统计分析.结果 在自然病程下的CHB孕妇,其HBV-DNA的复制水平增加,在T1期、T2期、T3期呈升高趋势,且差异有统计学意义(P均＜0.05).对不同孕期CHB孕妇血清中的肝功能检测指标进行比较,仅发现AST、GGT较对照组异常升高,且随孕期的增加不断升高,伴随妊娠全过程(P均＜0.05).对各个孕期HBV-DNA载量与肝功能指标进行相关性分析,发现HBV病毒载量的高低与肝功能无显著相关性(P均＞0.05).结论 (1)自然病程下的CHB孕妇HBV-DNA载量呈升高趋势.对于不接受治疗的CHB孕妇,应加强随访,控制母婴传播的风险. (2)HBV-DNA阳性CHB孕妇在未经抗病毒治疗的情况下,可能存在一定程度肝细胞的损害. (3) HBV-DNA载量与肝功能指标并无显著相关性,不能以病毒载量的高低判断肝功能受损程度.
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乙型肝炎患者凝血功能与血清HBV-DNA含量的相关性
目的 研究乙型肝炎患者凝血功能与血清HBV-DNA含量之间的关系与意义.方法 收集乙型肝炎患者486例,健康人群50例作为正常对照,分别检测其凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)等三项凝血功能指标及血清HBV DNA含量.分析PT、Aplvr、FIB等指标在不同血清HBV-DNA含量组中的变化及意义.结果 除HBV-DNA＜103copy/ml含量组的PT值与正常对照无差异外,其它各组PT值与正常对照组比较均有差异,特别是103copy/ml＜
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荧光定量聚合酶链反应在慢性乙型肝炎疗效中的应用
目的通过用荧光定量PCR技术对乙型肝炎患者血清中HBV-DNA含量进行即时检测,随时观察患者的用药效果,指导临床及时调整治疗方案.方法采用拉米夫定+干扰素+胸腺肽和拉米夫定+自拟方(乙型肝炎消毒汤加减)分A、B两组对乙型肝炎患者进行治疗,用荧光定量聚合酶链反应(FQ+PCR)动态检测血清中HBV-DNA含量.结果两组治疗方案的有效率、转阴率差异无显著性.而反弹率B组低于A组,差异有显著性.结论荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测技术高度的灵敏性、特异性、精确性以及操作简单、时间短、不易交叉污染等优点,为临床提供了一个能宏观地反映体内乙型肝炎病毒复制情况的较客观的指标,以进行药物的选择和搭配.
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肝炎标志物、HBV-DNA定量在慢性乙型肝炎诊断和治疗中的价值
目的:比较乙型肝炎患者血清中乙肝标志物与HBV DNA含量之间的关系并分析其临床意义.方法:采用微粒子发光分析法检测60例患者血清中乙肝标志物时采用荧光定量PCR法检测患者血清中HBV DNA含量.结果:(1)检测血清HbeAg含量与HBV-DNA含量对数值成正相关(r=0.411,P=0.000)(2)提示HBCAg阳性组与阳性组的HBV DNA阳性份数为90.9%、62.5%.两组相比,P<0.001(3)HbsAgHBeAgHBcAb阳性模式与HBVV DNA阳性的符合率高.结论:HBV DNA定量检测特异性强,灵敏度高,同HbeAg阳性呈正相关,是乙型肝炎诊断和观察抗病毒治疗的一项可靠的判断指标,与ALT无相关关系,临床应结合二者对病情进行综合判断.HBCAg与HBV DNA同是HBV活跃复制的指标,可用于临床诊断.
