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雌激素受体α在六氟双酚A诱导细胞外调节蛋白激酶激活中的作用研究

韩啸宇;高文辉;施嘉琛;李明;邵兵

摘要: 目的 研究六氟双酚A (bisphenol AF,BPAF)诱导T47D乳腺癌细胞中细胞外调节蛋白激酶(extraeellular regulated protein kinases,ERK)激活的分子机制,探讨雌激素受体α(estrogen receptor α,ERα)在BPAF诱导ERK激活过程中的作用.方法 通过蛋白免疫印迹实验(Western Blot)检测ERK磷酸化水平,研究BPAF对ERK磷酸化的诱导作用.运用表达ERα shRNA的慢病毒感染细胞,下调表达ERα,研究ERα在BPAF激活ERK过程中的作用.结果 Western Blot结果显示,BPAF在浓度为50 nmol/L时即可诱导ERK磷酸化水平显著升高(P<0.05),并且随着剂量的升高呈现出剂量-效应关系.当BPAF浓度达到1μmol/L时ERK磷酸化水平达到高(P<0.05).BPAF诱导ERK激活时间效应实验中,BPAF处理细胞5~60 min时,ERK磷酸化水平均显著升高(P<0.05),在BPAF处理细胞15 min时,ERK磷酸化水平达到高.在运用表达ERαshRNA的慢病毒感染细胞后,ERα的表达水平显著降低(P<0.05).与正常细胞相比,在下调表达ERα的细胞中,BPAF对ERK磷酸化的诱导作用显著降低(P<0.05).结论 BPAF能够诱导ERK磷酸化,并且呈现剂量-效应关系.ERα在BPAF诱导的ERK激活过程中起到重要作用.

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