9-顺维甲酸对前列腺癌细胞系LNCaP中同源盒基因NKX3.1表达的影响
摘要: 目的:研究9-顺维甲酸对前列腺癌细胞系LNCaP中同源盒基因NKX3.1表达的调节作用.方法:采用流式细胞术、反转录PCR和Western Blot技术检测9-顺维甲酸对LNCaP细胞周期及NKX3.1表达的影响;构建和转染NKX3.1启动子-报告基因质粒及其缺失突变体,通过报告基因活性测定,鉴定NKX3.1启动子中受9顺-维甲酸调控的区域.结果:通过转染及报告基因检测,发现9-顺维甲酸在LNCaP细胞中可明显提高NKX3.1启动子的活性;RT-PCR和WesternBlot结果显示,9-顺维甲酸可提高NKX3.1 mRNA和蛋白的表达,并呈剂量依赖性;通过启动子缺失突变分析,发现NKX3.1基因上游-936至-921区明显受9-顺维甲酸诱导调节;流式细胞术分析细胞周期的结果显示,9-顺维甲酸可阻止LNCaP细胞于G1期,减少G2/M期细胞.结论:9-顺维甲酸作为诱导分化剂可阻止LNCaP细胞于G1期,减少细胞有丝分裂,并明显上调前列腺特异的抑癌基因NKX3.1的表达.
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