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CDK5在血管性认知障碍大鼠海马中的表达
目的：探讨细胞周期素依赖性蛋白激酶5（CDK5）在血管性认知障碍（VCI）大鼠海马组织中的表达变化及其可能作用。方法将雄性 SD 大鼠80只随机分为大脑中动脉梗塞（MCAO）组、假手术组及正常对照组，采用改良线栓法建立 MCAO 大鼠模型，30d 后进行水迷宫实验评价并筛选 VCI 大鼠，分别应用RT－PCR、Western－blot 方法检测各组大鼠海马组织 CDK5 mRNA 及 CDK5蛋白的相对表达量。结果VCI 大鼠海马组织 CDK5的表达水平明显升高（P＜0．05）。结论CDK5可能参与了大鼠 VCI 的发生。
关键词： 细胞周期素依赖性蛋白激酶 5 血管性认知障碍 大鼠 -
抑制细胞周期素依赖性蛋白激酶5对小鼠足细胞凋亡的影响
目的：探讨细胞周期素依赖性蛋白激酶5（Cdk5）在高糖刺激体外培养小鼠足细胞中的表达及抑制 Cdk5表达对高糖诱导足细胞凋亡的影响。方法（1）体外培养条件性小鼠足细胞，分为正常糖组、甘露醇组、高糖组，高糖组按不同刺激时间分为0、6、12、24、48 h 5组，应用蛋白质印迹（Western blot）法检测足细胞中 Cdk5蛋白表达水平。（2）应用 Cdk5 miRNA 干扰质粒抑制足细胞中 Cdk5基因的表达水平。分别设立：NG 组（正常糖）；HG 组（高糖）；HG ＋ S 组（高糖＋ Scrambled 阴性质粒）；HG ＋ C 组（高糖＋ Cdk5 miRNA 质粒）。以上各组细胞培养48 h 后，应用流式细胞术和末端脱氧核苷酰基转移酶介导性 dUTP 切口末端标记（TUNEL）法检测足细胞凋亡水平，Western blot 法检测凋亡相关蛋白 B 细胞淋巴瘤/白血病-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关 X 蛋白（Bax）和分裂型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cleaved caspase-3）的蛋白表达水平。结果与正常糖组相比，高糖刺激后，足细胞中Cdk5的蛋白表达水平明显增加（P＜0．05）。 Cdk5 miRNA 干扰质粒能显著抑制足细胞中 Cdk5的表达水平。与 HG 组和 HG ＋ S组相比，HG ＋ C 组足细胞凋亡率显著降低（P＜0．05），凋亡相关蛋白 cleaved caspase-3蛋白表达水平和 Bax/Bcl-2蛋白表达比率也有明显降低（P＜0．05）。结论高糖刺激可以增加足细胞中 Cdk5蛋白的表达水平；抑制 Cdk5表达可以降低高糖刺激诱导的足细胞凋亡。
关键词： 细胞周期素依赖性蛋白激酶 5 糖尿病肾病 足细胞 细胞凋亡
