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右旋-色氨酸对变异链球菌生物膜形成及离散的影响
目的:探讨右旋-色氨酸(D-Trp)对变异链球菌(S. mutans)生物膜形成及离散的影响,以及在D-Trp作用下S. mutans对氯己定(CHX)药物敏感性的变化。方法吸光度法检测5.0 mmol/L D-Trp对悬浮S. mutans生长的影响,非处理组不作D-Trp处理;结晶紫染色法检测1.0、2.5及5.0 mmol/L D-Trp处理组S. mutans生物膜形成的变化,非处理组不添加D-Trp;结晶紫染色法及激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察1.0、2.5及5.0 mmol/L D-Trp处理组对24 h S. mutans生物膜的离散作用;刃天青钠盐指示法检测5.0 mmol/L D-Trp处理(实验组)和阴性对照组的小抑菌浓度(MIC)及小生物膜抑菌浓度(MBIC)。结果单菌种悬浮S. mutans在D-Trp处理组与非处理组的作用下,28 h内生长趋势一致,均从4 h开始进入对数期,22 h到达平台期。1.0、2.5及5.0 mmol/L D-Trp处理组与非处理组相比,S. mutans生物膜在0~72 h内生物膜生物量均随时间推移而增加;同一时间点,各处理组各时点生物膜生物量均低于非处理组(P<0.05)。结晶紫染色法示1.0、2.5及5.0 mmol/L D-Trp处理组生物膜生物量(OD570)均低于非处理组(P<0.01)。激光扫描共聚焦显微镜观察结果显示,1.0、2.5及5.0 mmol/L D-Trp处理组均有细菌黏附于介质表面,处理组生物膜生物量低于非处理组(P<0.01)。实验组和阴性对照组对S. mutans的MIC均为0.073 mg/L,对S. mutans的MBIC分别为0.293 mg/L和2.344 mg/L,添加5.0 mmol/L D-Trp后,CHX对S. mutans的MBIC降至1/8。结论 D-Trp能够抑制生物膜形成,促进已形成生物膜离散,并提高S. mutans对CHX的敏感性。