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应用SELDI-TOF-MS技术分析慢性乙肝患者血清差异表达蛋白
[目的]应用表面加强激光解析离子化飞行时间质谱(surface enhanced laser desorption-ionization timeof-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术分析慢性乙肝患者血清差异表达蛋白.[方法]选择临床明确诊断的慢性乙肝患者和正常健康体检者各12名,利用弱阳离子芯片CM10经质谱分析血清中差异表达蛋白.[结果]样品血清中共获得与芯片结合的67个有效蛋白质峰.其中相对分子质量4 107、4 980、5 650、5 923道尔顿的4个蛋白峰有差异,相对分子质量为4 980道尔顿的蛋白峰在慢性乙肝组高表达.经检索,发现相对分子质量为4 980道尔顿的蛋白与细胞色素B相对分子质量相符.[结论]利用SELDI-TOF-MS技术寻找慢性乙肝患者无创性血清学指标是一种可行的方法,细胞色素B可能在慢性乙肝形成中起一定作用.
关键词： 慢性乙型肝炎 表面加强激光解析离子化飞行时间质谱 蛋白质组学 -
无排卵性功能失调性子宫出血患者血清标志物的筛选、鉴定及其在月经血中的表达
目的:筛选并鉴定无排卵性功能失调性子宫出血(anovulatory dysfunctional uterine bleeding,ADUB)患者血清中的蛋白标志物,并检测被筛选蛋白标志物在ADUB患者月经血中的表达,探讨其与ADUB的相关性.方法:采集128例ADUB患者、93例月经正常妇女(对照组)的血液标本,分离血清,同时收集她们的月经血,分离上清.应用CM10蛋白芯片进行蛋白质检测,采用Biomarker WizardTM3.2软件分析检测结果.应用Tricine-SDS-PAGE胶分离、质谱鉴定和免疫共沉淀对检测到有差异的蛋白质峰进行蛋白质鉴定.然后采用ELISA,RT-PCR和Western印迹检测被筛选标志蛋白在ADUB患者月经血上清中的表达.结果:筛选到5个有差异的蛋白质峰,其中ADUB患者组在11.80 km/z的蛋白质峰强度值明显大于对照组(P<0.05),在13.59 km/z的蛋白质峰强度值明显低于对照组(P<0.05),两组在蛋白质峰为13.79,13.85和14.20 km/z的强度值差异没有统计学意义(P>0.05).11.80 km/z的蛋白质峰被鉴定为血清淀粉样蛋白A(SAA),13.59 km/z的蛋白质峰被鉴定为血管内皮细胞生长因子(VEGF).在ADUB患者月经血上清中,SAA表达显著高于对照组(P<0.05),而VEGF的表达明显低于对照组(P<0.05).结论:成功筛选和鉴定出与ADUB相关的两个血清蛋白标志物SAA和VEGF,ADUB患者SAA表达上调,而VEGF表达下调,这是ADUB病因或疾病发生结果还有待进一步证实.
