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胰岛素/furin文献资料
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葡萄糖调控的胰岛素原真核表达载体的构建
[目的]构建胰岛素原真核表达载体,在肝细胞内实现葡萄糖调控下的成熟胰岛素的表达.[方法] (1)RT-PCR方法从胎儿胰腺获取野生型人胰岛素原cDNA;(2)重叠延伸PCR法在人胰岛素原cD N A上制造两个点突变,该胰岛素原cDNA片段命名为胰岛素/furin(INS/furin);(3)将INS/furi n亚克隆至含葡萄糖反应元件(GlRE)的p(GlRE)3BP-1Luc的多克隆位点上.[结果]HindⅢ和EcoRV酶切及测序均证实载体p(GlRE)3BP-11×furin构建成功 .[结论]含葡萄糖反应元件的点突变胰岛素原基因真核表达载体p(GlRE) 3BP-11×furin有望成为糖尿病基因治疗理想的候选载体之一.
