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荧光报告系统文献资料
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NKp46-Cre介导的YFP报告基因系统标记小鼠NK细胞的特异性和效率检测
目的:检测NKp46-Cre介导的黄色荧光蛋白(YFP)报告基因系统在小鼠体内自然杀伤细胞的效率以及特异性.方法:通过ROSA26R-YFP与NKp46-Cre小鼠杂交产生后代并且利用基因型鉴定的方法筛选出双阳性的基因型小鼠,流式细胞术检测小鼠体内免疫器官淋巴结、脾脏以及骨髓中的YFP的表达效率,然后用细胞表面抗体标记脾脏的淋巴细胞,分析淋巴细胞群体中YFP阳性细胞的百分比.结果:选取ROSA26R-YFP与NKp46-Cre小鼠杂交后代中基因型为ROSA26R-YFP(+/+)Cre(+/-)的小鼠为实验组,ROSA26R-YFP(-/-)Cre(-/-)的小鼠为对照组;流式细胞术分析免疫器官(淋巴结、骨髓、脾脏)YFP的阳性细胞的比例分别为0.589％±1.02％、1.89％±1.28％、4.53％±1.54％,对照组YFP的阳性细胞的比例分别为0.008％±0.003％、0.126％±0.08％、0.12％±0.004％;两种小鼠的非免疫器官(心脏)YFP阳性的细胞为0.009％±0.0002％、0.03％±0.012％;脾脏淋巴细胞系中各免疫细胞(NK细胞、T细胞、B细胞)YFP阳性百分比为89.4％±1.08％、0.89％±0.56％、0.82％±0.82％.结论:NKp46-Cre介导的YFP报告基因系统标记NK细胞具有明显的特异性.
