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基因指纹法预测鼻咽癌放射敏感性初步研究
目的:研究放射敏感与放射抵抗的鼻咽癌组织基因表达差异,寻找预测鼻咽癌放射敏感性基因指纹.方法:采用BioStarH-141s(2004)型含14112点的人类全长基因cDNA表达谱芯片,对19例不同放射敏感性鼻咽癌组织进行检测,其中放射敏感8例,放射抵抗11例,用T-test检验、聚类、LOOCV等方法进行生物信息分析.结果:放射抵抗组与放射敏感组比较,表达差异的基因P<0.5有923条,P<0.01有164条,P<0.001有17条;与慢性炎症组织相比,放射敏感组70%以上病例有2倍以上表达差异的基因267条,明显高于放射抵抗组106条.这些基因包括已知的与放射敏感性密切相关的基因PRKD,DCK等;还有大部分以前没有描述与放射敏感性相关的基因,如SIRT1,RABAC1,PPP1CC,ZNF638,APPBP1,RABAC1等,它们主要与细胞周期、S期和M期调控点、细胞凋亡、细胞生长、DNA绑定,RNA绑定等功能有关;还有一些新发现的,功能尚未明确的基因,如CUTA,ZNF148,Sep15,TMTC3,TOP1等.取P<0.01的差异表达基因98条进行聚类分析,19例患者能分成放射敏感与抵抗二类,除1例外,所有病例敏感性的分类均与临床结果相符.用LOOCV验证,准确率100%.结论:不同放射敏感性的鼻咽癌组织,基因表达存在明显差异,与炎症组织比较,放射敏感组的基因表达差异更大,可利用差异基因簇进行放射敏感性分类,提示可利用基因指纹法进行鼻咽癌放射敏感性预测.
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马尔尼菲青霉AP-PCR基因指纹分析
目的:观察马尔尼菲青霉基因特征及与致病的相关性.方法:采用AP-PCR技术,以P235′-AGTCAGCCAC-3′,P1055′-AGTCGTCCEE-3′,P120 5′-GGGAGACATC-3′为单引物对12株竹鼠分离的马尔尼菲青霉及3株临床分离菌株进行DNA指纹分析.结果:①菌株DNA指纹图谱呈多态性,主要带型相同;②引物P23扩增竹鼠分离菌株与临床分离菌株DNA带型有较大差异.结论:马尔尼菲青霉基因差异可能与致病力相关.