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阿霉素损伤心肌细胞miRNA378与网腔钙结合蛋白、内质网应激的关系
目的:研究阿霉素损伤心肌细胞miRNA378与网腔钙结合蛋白(calumenin)、内质网应激相关性.方法:原代培养乳鼠心肌细胞分为6组:对照组、阿霉素组、miRNA378过表达对照组、miRNA378过表达组、miRNA378沉默对照组、miRNA378沉默组,采用免疫组化法检测细胞α-SMA蛋白;慢病毒质粒转染心室肌细胞,实时荧光定量PCR技术检测各组心肌细胞miRNA378、calumenin及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)mRNA表达.结果:与阿霉素组相比较,miRNA378过表达组心肌细胞calumenin mRNA表达增加(P＜0.01),而GRP78 mRNA表达减少(P＜0.01);与阿霉素组相比较,miRNA378沉默组calumenin及GRP78 mRNA表达无统计学差异.结论:阿霉素损伤乳鼠心肌细胞是通过减少calumenin蛋白表达进而引起内质网应激,该作用通过上调miRNA378得到缓解.
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黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒感染乳鼠心肌细胞miRNA378和miRNA378*表达的影响
目的:研究柯萨奇B3病毒(CVB3)感染乳鼠心肌细胞miRNA378和miRNA378*表达的作用.方法:原代培养乳鼠心肌细胞分3组(n=6):对照组(正常细胞)、CVB感染组(正常细胞+CVB3)、黄芪总黄酮组(正常细胞+CVB3+黄芪总黄酮).CVB感染组感染CVB3,黄芪总黄酮组感染CVB3同时给予黄芪总黄酮20 mg/L.采用免疫组化方法检测乳鼠心室肌细胞α-SMA蛋白,实时荧光定量PCR技术检测各组心肌细胞miRNA378及miRNA378*表达.结果:①与对照组相比较,CVB感染组心肌细胞miRNA378及miRNA378*表达明显减少(P＜0.01);②与CVB感染组比较,黄芪总黄酮心肌细胞miRNA378及miRNA378*表达明显增加(P＜0.0l).结论:黄芪总黄酮可以减少CVB3感染心肌细胞miRNA378及miRNA378*表达.
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阿霉素损伤心肌细胞miRNA378*与calumenin、GRP78、bax及bcl-2相关性研究
目的:研究阿霉素损伤心肌细胞miRNA378*与网腔钙结合蛋白(calumenin)、内质网应激伴侣蛋白GRP78、凋亡因子bax及bcl-2相关性.方法:实验分6组:对照组、阿霉素组、miRNA378*过表达对照组、miRNA378*过表达组、miRNA378*沉默对照组、miRNA378*沉默组.原代培养乳鼠心肌细胞,采用免疫组织化学方法检测培养乳鼠心室肌细胞α-SMA蛋白,慢病毒质粒转染心室肌细胞,实时荧光定量PCR技术检测各组心肌细胞miRNA378*、calumenin、GRP78、bax及bcl-2 mRNA表达.结果:①与对照组相比较,阿霉素组心肌细胞calumenin mRNA表达明显减少(P＜0.01),GRP78 mRNA表达增加(P＜0.01),bax mRNA表达增加(P＜0.01),bcl-2mRNA表达明显减少(P＜0.01).②与阿霉素组相比较,miRNA378*过表达组心肌细胞calumenin mRNA表达增加(P＜0.01),bcl-2mRNA表达增加(P＜0.01),而GRP78 mRNA表达减少(P＜0.01),bax mRNA表达减少(P＜0.01).与阿霉素组相比较,miRNA378*沉默组GRP78、bax mRNA表达增加(P＜0.01),bcl-2 mRNA表达减少(P＜0.01).结论:阿霉素损伤可能引起心肌细胞calumenin表达减少进而发生内质网应激;上调miRNA378*表达会增加阿霉素损伤心肌细胞calumenin表达缓解内质网应激,进而抑制心肌细胞凋亡;而沉默miRNA378加重阿霉素损伤心肌细胞内质网应激及促进心肌细胞凋亡.
