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抗菌处理对猪肺动脉瓣膜细胞活性及组织结构的影响
目的探讨抗菌处理对肺动脉瓣膜细胞活性和组织结构的影响因素及优化同种瓣膜的制备方法.方法3组猪肺动脉瓣叶(n=6)浸泡在含抗生素的DMEM液中,在不同温度下孵育6 h或24h.然后通过XTT比色法测定瓣膜细胞活性,用免疫组织化学荧光染色检测瓣膜细胞和细胞外基质,并行光镜观察.结果抗菌时间为24 h,37℃抗菌组与4℃抗菌组的瓣膜细胞活性与瓣膜组织结构无明显区别.抗菌6 h组的瓣膜细胞活性与瓣膜组织结构明显优于抗菌24 h组.结论抗菌时间为24 h时,抗菌温度对瓣膜细胞活性及结构完整性无明显影响.抗菌时间缩短至6h,有利于瓣膜细胞活性与结构完整性的保持.
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液氮冷冻保存对主动脉瓣膜细胞活性及细胞外基质的影响
液氮冷冻保存是目前好的同种心瓣膜保存方法,但液氮冷冻保存也可导致瓣膜的结构损害.为了探讨液氮冷冻保存对主动脉瓣膜组织结构的影响情况,本实验通过采用XTT比色法、形态学观察、免疫组织化学荧光染色法研究了不同冷冻保存时间对猪主动脉瓣膜细胞活性及细胞外基质的影响.研究结果显示,液氮保存后瓣膜细胞活性明显下降(P<0.05),细胞超微结构损害增加,可溶性细胞外基质纤维连接蛋白与硫酸软骨素不同程度流失,间质胶原纤维排列紊乱.但在冻存时间小于3月时,损害的程度与冻存时间无明显关系.