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  • 多穗柯黄酮3-羟化酶基因的克隆与序列分析

    作者:尹峰;龙月红;冯若宣;林丽梅;黄剑;邢朝斌

    目的 克隆多穗柯Lithocarpus polystachyus黄酮3-羟化酶(flavanone 3-hydroxylase,F3H)基因,了解其基因特征并初步探明其在各器官中的表达情况.方法 分别提取多穗柯叶片的总RNA及基因组DNA,根据转录组测序结果,设计特异性引物,PCR扩增得到多穗柯F3H基因的cDNA及DNA序列,测序后进行生物信息学分析,通过qRT-PCR法检测多穗柯F3H基因在不同器官中的表达情况.结果 多穗柯F3H基因cDNA全长1 340 bp,包含长1 092bp的开放阅读框,编码363个氨基酸的蛋白质,定位于细胞质中.qRT-PCR结果表明F3H基因在多穗柯各器官中均有表达,但表达量具有显著性差异(P<0.05).结论 首次对多穗柯F3H基因进行了克隆和生物信息学分析,证实F3H基因在多穗柯不同器官中表达量差异显著,为多穗柯中黄酮类的次生代谢研究奠定了基础.

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