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佛手茎尖玻璃化超低温保存和植株再生
目的 为佛手种质资源的保存提供一条新途径.方法 对佛手茎尖进行了玻璃化超低温保存,并对保存后的茎尖进行微嫁接试验,获得再生植株.结果 佛手茎尖在含5%DMSO和5%蔗糖的MS培养基上预培养48h后,切取3～4 mm的茎尖,室温(25℃)下装载液(60%PVS_2)预处理30 min,0℃下玻璃化液PVS_2处理80 min,投入液氮保存24 h后取出,在40℃水浴快速化冻,室温下分别用1.2 mol/L蔗糖和MT基本培养基洗涤2次,每次10 min.保存后的茎尖经TTC法检测,成活率达81.25%;将茎尖嫁接到黑暗培养基的砧木上,再生率可达52.94%,且再生植株生长和分化正常,经PCR检测不含黄龙病病原.结论 玻璃化超低温保存方法可用于佛手种质资源保存.
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茎尖微嫁接技术脱除佛手病原体的研究
目的 采用茎尖微嫁接技术脱除佛手病原体,为无病苗木的培育奠定基础.方法 采用茎尖微嫁接技术获得了佛手微嫁接成活苗,应用PCR技术对其进行黄龙病痛原进行检测,同时考察了茎尖大小对嫁接成活率和脱病原体率的影响.结果 经PCR检测,微嫁接苗脱除了黄龙病病原;茎尖大小对嫁接成活率和脱病原体率的影响较大,带4个叶原基的茎尖嫁接成活率高,达60.00%,脱病原体率为85.71%,带2个叶原基的茎尖,脱病原体率达100%,但嫁接成活率低.结论 茎尖微嫁接技术可以脱除佛手病原体,综合考虑嫁接成活率和脱病原体的效果,宜选用带3～4个叶原基的茎尖进行脱病原体苗的生产.
关键词： 佛手 茎尖微嫁接 聚合酶链式反应(PCR) -
影响佛手茎尖微嫁接成活率的因素
[目的]探讨影响佛手茎尖微嫁接成活率的因素,为无病苗木的培育奠定基础.[方法]选用黑暗条件下培养的柠檬实生苗为砧木,佛手茎尖为接穗,将茎尖嫁接到砧木上胚轴的倒"T"形切口上,获得茎尖微嫁接苗,并对影响嫁接成活率的一些因素如砧木苗龄、茎尖大小、培养基中不同激素水平及砧木是否带子叶嫁接进行研究.[结果]接穗选择带4个叶原基的茎尖、砧木选择黑暗培养14 d的柠檬实生苗且嫁接时保留子叶,可获得较高的嫁接成活率;培养基中添加0.1mg/L α-萘乙酸,嫁接成活率高,嫁接苗长势好.[结论]优化了佛手茎尖微嫁接条件,显著提高了嫁接成活率和嫁接苗的长势.
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红花茎尖微嫁接技术研究
目的 探讨红花茎尖微嫁接技术,为解决转基因红花植株生根困难问题提供一个新的途径.方法 光照条件下培养红花实生苗用作砧木,以红花组培苗茎尖为接穗,采用劈接法和顶接法进行茎尖微嫁接试验,并对影响嫁接成活率的因素进行研究.结果 成功获得了红花茎尖微嫁接苗,并优化了嫁接的条件:选取苗龄为14d的红花实生苗为砧木,嫁接成活率较高；采用劈接法进行茎尖微嫁接,效果较好,嫁接成活率可达56.7％,而顶接法成活率仅为16.7％.结论 本研究建立了红花茎尖微嫁接的方法,获得了嫁接成活苗.
