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葡萄糖腹膜透析液对人腹膜间皮细胞线粒体活性氧的影响
目的 观察不同浓度葡萄糖腹膜透析液对人腹膜间皮细胞线粒体活性氧(ROS)的影响. 方法 体外培养人腹膜间皮细胞株第5至10代(HMrSV5,DMEM/F12培养基含10%胎牛血清)用于实验研究. MTT检测细胞活力,实验分为7组:对照组、1.5%Dextrose组、2.5%Dextrose组、4.25%Dextrose组、线粒体呼吸链复合酶Ⅰ抑制剂Rotenone组(5μM)、线粒体呼吸链复合酶Ⅱ抑制剂Thenoyltrifluoroacetone (TTFA)组(5μM)、线粒体呼吸链复合酶Ⅲ抑制剂Antimycin A组(100μg/ml),应用流式细胞仪检测总线粒体、呼吸线粒体、超氧化线粒体. 结果 各组作用12h,1.5%Dextrose、2.5%Dextrose、4.25%Dex-trose、Rotenone、Antimycin A组总线粒体、超氧化线粒体明显增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),TTFA组与对照组比较无明显差异. 结论 葡萄糖腹膜透析液作用下人腹膜间皮细胞线粒体活性氧产生增加.
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线粒体活性氧与肿瘤的研究进展
线粒体活性氧(mitochondrial reactive oxygen species,mROS)是线粒体电子传输链的有毒副产品,同时mROS可作为一种信号分子促进细胞生长.肿瘤细胞内某些致癌基因激活,抑癌基因受抑制及缺氧可诱导mROS升高,从而激活与肿瘤细胞生存转移、代谢转变和血管形成相关的信号通路.本文就肿瘤细胞高mROS水平产生机制,mROS在肿瘤细胞内参与调控的主要信号通路,以及新的mROS介导的靶向疗法研究进展作一综述.
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百草枯诱导AML12细胞凋亡过程中线粒体活性氧的作用
目的:探讨百草枯诱导小鼠肝细胞系AML12细胞凋亡过程中线粒体活性氧的作用.方法:AML12细胞分别给予o、25、50、100、200、300 μmol/L的百草枯处理.采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力;AnnexinV/PI双染法结合流式细胞术检测细胞凋亡率;DCFH-DA荧光探针经流式细胞仪测定细胞内活性氧水平;MitoSOX荧光探针检测线粒体活性氧变化;激光共聚焦测定JC-1探针荧光强度以检测线粒体膜电位变化.结果:与对照组比较,25～300 μmol/L的百草枯处理后可以诱导AML12细胞活力下降,且具有剂量效应关系(r=-0.94,P＜0.01);300 μmol/L的百草枯作用24h可明显诱导AML12细胞发生凋亡(P＜0.05);25～300μmol/L百草枯处理24h后细胞内活性氧依次增加(P＜0.05),25～100 μmol/L百草枯作用24 h时线粒体活性氧增加且呈剂量效应关系(r=0.98,P＜0.05),而200和300 μmol/L的百草枯作用24h时线粒体活性氧水平降低(P＜0.05).细胞活力下降与细胞内活性氧升高呈负相关(r=-0.90,P＜0.05);晚期凋亡细胞的比例与细胞内活性氧呈正相关(r=0.96,P＜0.01);JC-1检测线粒体膜电位结果显示,与对照组相比,300 μmol/L的百草枯处理24 h时线粒体膜电位显著降低(P＜0.05).结论:百草枯诱导AML12细胞凋亡过程主要由细胞整体水平的活性氧介导,提示线粒体活性氧并未直接参与百草枯诱导的肝损伤过程.
