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细胞外信号调节蛋白激酶1在缺氧后脑损伤中的表达模式
目的 通过了解细胞外信号调节蛋白激酶1 (ERK-1)在缺氧脑损伤大鼠脑中的表达,了解其参与缺氧脑损伤的过程.方法 48只3d龄新生SD大鼠,随机分成2组:对照组和缺氧组,每组各24只,缺氧组SD大鼠置于自制密闭容器中,充以含8％氧气的氧氮混合气体,时间为90 min,对照组SD大鼠不进行处理.分别于造模后6个时间点——1、3、7、14、21 d和28 d后留取两组SD大鼠脑组织,采用Western blot检测ERK-1总蛋白在脑组织中的表达情况.结果 缺氧组大鼠脑组织ERK-1呈现动态表达;变化规律:在缺氧早期(缺氧后1～7 d),ERK-1总蛋白的表达均有降低的趋势,缺氧后第14天开始其表达具有升高的趋势,缺氧后第21天和第28天ERK-1表达量又有所下降,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 缺氧造成新生大鼠脑损伤时,ERK-1总蛋白的表达谱没有明显变化的趋势,提示在早产儿缺氧性脑损伤时ERK-1并不通过剂量的变化对缺氧后脑组织损伤进行调节.
关键词： 早产儿 缺氧性脑损伤 细胞外调节蛋白激酶1 大鼠 -
促凋亡蛋白Bad和细胞外调节蛋白激酶对膀胱癌多重耐药细胞的作用机制研究
目的 检测人膀胱癌耐药细胞T24/Ifex和亲本细胞T24中细胞外调节蛋白激酶(ERK)1、ERK2、ERK5和Bad的表达,探讨其对膀胱癌细胞多药耐药(MDR)的影响.方法 人膀胱癌耐药细胞株T24/Ifex用小剂量缓慢诱导法诱导;CCK-8法检测T24/Ifex对多种化疗药物的敏感性;Western blot检测MRP-1、P-gp、ERK1、ERK2、ERK5和Bad蛋白的表达;荧光定量PCR检测Bad mRNA的表达.结果 成功建立膀胱癌耐药细胞株T24/Ifex,其对Ifex、DOC和CDDP的耐药指数分别为7.359、3.892和4.297,且高表达MRP-1和P-gp蛋白.与亲本细胞T24比较,T24/Ifex中ERK1、ERK2和ERK5的表达升高,ERK1蛋白磷酸化水平无显著变化,ERK2磷酸化水平下降,且p-ERK1/2与ERK1/2的比值下降.Bad的mRNA和蛋白表达下降.结论 ERKs和Bcl-2家族促凋亡蛋白Bad表达与人膀胱癌MDR的发生密切相关.
