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微重力对人类细胞影响的研究进展
在载人航天技术迅猛发展的今天,空间环境的特殊性(高真空、空间辐射、微磁场及微重力等)对机体产生的一系列影响是制约载人航空发展的重要因素.宇航员在进行外太空飞行后出现的立位耐力不良、骨质疏松、肌肉萎缩等多种生理及病理改变是由太空的特殊环境作用于各种细胞引起的.已有大量研究通过搭载空间飞行器或模拟器对微环境下细胞发生的变化及机制进行了探讨.微重力下细胞骨架的形态,细胞的周期与分化,基因的表达和信号转导均发生了变化.然而,微重力条件下细胞骨架蛋白,调控细胞周期与分化的各类蛋白质如何变化仍有待进一步研究.
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氧自由基清除剂对砷所致细胞DNA损伤的保护作用
目的探讨砷引起细胞DNA损伤和细胞毒性的机理.方法用羟基自由基(@OH/OH-)清除剂DMS O和过氧化氢(H2O2)清除剂过氧化氢酶(catalase,CAT)与不同浓度的砷共同处理人类早幼粒细胞系HL60细胞和人淋巴细胞,用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测细胞DNA损伤.结果 2.4和4.8μmo1的砷分别引起了HL60和人淋巴细胞显著的DNA损伤.DMSO和CAT完全消除了低剂量砷引起的DNA损伤,减少了70%以上的高剂量砷引起的DNA损伤.结论微量砷可引起人类细胞不同程度的DNA损伤,DMSO和CAT可保护或减轻细胞的这些损伤,表明砷通过活性氧自由基,主要是H2O2和 O2-,引起人类细胞DNA损伤.
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应用单细胞凝胶电泳比较研究砷对人类细胞DNA的损伤
目的探讨不同细胞对砷的基因毒性反应及其机理；探讨快速、敏感及经济的细胞基因毒性检测方法。方法应用单细胞凝胶电泳 (Single cell gel electrophoresis,SCGE)或彗星试验（comet assay）比较研究。结果细胞DNA损伤与砷处理量间呈显著的剂量反应关系和时效关系。受试细胞对砷的基因毒性反应的敏感性强弱顺序为：PMA-HL60>DMSO-HL60>HL60>淋巴细胞。人工计数彗星尾分级频数与计算机自动测量彗星尾DNA泳动量的结果完全一致,用非参数Mann-Whitney多变量检验分析彗星尾分级频数的显著性与参数Tukey多变量检验分析量彗星尾DNA泳动量的显著性完全相同，而且不同浓度的砷与5级彗星尾频数的相关性比其与阳性彗星尾总数间的更为显著。结论微量砷即可引起细胞不同程度的DNA损伤，不同细胞亚群对砷的基因毒性反应不同。SCGE是一个简便、快速、敏感及经济的细胞基因毒性检测方法，可应用于各级水平的环境与人类疾病（砷污染）监测与研究。
关键词： 单细胞凝胶电泳(SCGE) 砷 人类细胞 DNA损伤 -
小分子双链RNA对人类细胞中抑癌基因p21表达的上调作用
目的 筛选更多的对小分子双链RNA(dsP21-322)介导抑癌基因p21WAF1/CIP1激活起效应的人类细胞系,并初步研究该过程是否依赖p53的表达.方法 选择4种表达不同类型p53蛋白的人类细胞系,p53野生型(p53 wild type)的人骨肉瘤细胞系U2-OS、人肾上皮细胞系293T,p53突变型(p53 mutant type)的人宫颈癌细胞系HeLa及p53缺失(p53 null)的人肺腺癌细胞系NCI-H1299,转染dsControl(阴性对照)或dsP21-322至以上细胞,RT-qPCR和Western blot分别检测p21、p53 mRNA和蛋白表达的变化.结果 dsP21-322的转染未明显影响上述细胞系p53的表达;而在U2-OS、HeLa和293T细胞系中均能激活p21的表达,相比dsControl,分别上调p21 mRNA的表达3.97倍、4.94倍和4.64倍,Western blot进一步证明在这3种细胞系中p21蛋白表达水平的增加与p21 mRNA水平的上调相一致,且与dsControl组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05).但是在p53缺失的NCI-H1299细胞系中,dsP21-322则不能上调p21的表达.结论 dsP21-322介导p21激活现象存在于人类细胞,而其未能上调p53缺失细胞系中p21的表达是否提示该过程可能依赖p53的表达尚有待进一步研究.
