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LRP16编码蛋白的信息学分析及亚细胞定位研究
目的:探讨LRP16基因编码蛋白的基本生物学特征及其在真核细胞中的分布.方法:以Internet为操作平台、以国际公共生物数据库为实验材料、应用生物学软件为研究工具对LRP16编码蛋白进行了全方位的生物信息学分析.在此基础上,将该基因的编码序列重组到pEGFP-N1真核表达中,融合在绿色荧光蛋白(GFP)的N端转染HeLa细胞,激光共聚焦显微镜观察荧光分布.结果:LRP16编码产物主要与一些RNA病毒产生的与核酸结合的非结构蛋白有较高相似性,含有与功能未知的Motif:Hismacro、DUF27、A1pp相似的结构域.激光共聚焦显微镜扫描发现GFP分布于细胞核内.结论:LRP16基因编码一种起源古老、进化缓慢的核蛋白因子,在细胞多种生命活动过程中应有重要作用.
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LRP16蛋白在3T3-L1前脂肪细胞诱导分化中表达量的变化
目的 LRP16蛋白在3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程中表达量的变化及胰岛素对脂肪细胞LRP16蛋白表达的调控.方法 经典脂肪细胞诱导方案诱导前脂肪细胞为成熟脂肪细胞,每天(0-8d)均留取蛋白标本.不同浓度(0、1、10、100nmol/L) 胰岛素刺激脂肪细胞24h,分别留取蛋白标本.Western-Blot方法检测样本中LRP16蛋白的表达量.结果 LRP16蛋白在前脂肪细胞无表达或极低表达,从诱导的第3、4天开始表达,迅速升至高峰,此后维持在高表达水平.LRP16蛋白在第6-8天之间表达水平无统计学差异(P>0.05),其余各时段间表达水平均有显著差异(P<0.01).不同浓度胰岛素刺激脂肪细胞24h,细胞中LRP16蛋白表达量与胰岛素浓度呈负相关(P<0.01).结论 LRP16蛋白随着前脂肪细胞分化的开启,表达量从无到有逐渐增加至高峰,并一直维持在高表达水平;胰岛素(INS)负调控脂肪细胞LRP16蛋白的表达.
