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Idoxifene抗氧化应激导致的鼠肝细胞凋亡的机制
目的研究非激素类的雌激素拮抗物Idoxifene与氧化应激导致的鼠肝细胞凋亡之间的关系,进一步阐明其抗鼠肝纤维化机制.方法用次氮基三乙酸铁(ferric nitrilotriacetate,FeNTA)导致培养的鼠肝细胞处于氧化应激状态,在idoxifene存在的条件下培养细胞,用流式细胞仪,酶联免疫测定法,Western blot及凝胶阻滞实验等方法分别检测凋亡细胞,caspase-3活性,Bcl-2蛋白家族的表达及结合物蛋白1(activator protein-1,AP-1)结合活性.结果Idoxifene能显著抑制氧化应激导致的鼠肝细胞凋亡.在鼠肝细胞中,氧化应激可降低Bcl-2及Bcl-XL蛋白含量,激活caspase-3与AP-1.Idoxifene与处于氧化应激状态的细胞孵育12 h,使Bcl-2及Bcl-X L的蛋白含量分别是仅处于氧化应激状态下的3.01倍及1.68倍,使caspase-3活性下降了36.92%.同时idoxifene显著抑制氧化应激诱导的AP-1与其调控位点的结合活性,且此AP-1中的主要成分为c-jun与c-fos.结论Idox-ifene能通过抑制Bcl-2及Bcl-XL蛋白含量的下降及caspase-3及AP-1活性,抑制氧化应激导致的鼠肝细胞凋亡.
