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内吞和跨膜转运文献资料
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金纳米粒用于口服内吞转运机制研究的检测方法
口服纳米载体可以有效地提高难溶性药物的生物利用度,其与肠上皮细胞的相互作用研究也成为一大热点.在该领域的研究中,物理包载或化学偶联荧光基团的纳米载体常常被选择,但是物理包载荧光染料可能会发生泄漏,影响结果分析,而化学偶联荧光探针可能会改变纳米粒结构的表面特征.因此,需要寻找一种简便、准确的检测方法以探究口服纳米粒内吞及跨膜转运的过程、胞内分布和机制.本文选择金纳米粒为纳米模型载体,基于金纳米粒具有光散射的性质,以633 nm波长的激光为激发光源,通过激光扫描共焦显微镜(CLSM)检测金纳米粒溶液,肠道上皮细胞内及大鼠肠道中的金纳米粒.结果通过激光共聚焦显微镜反射光的模式,无论在细胞水平还是大鼠肠道中,都能够准确地检测到金纳米粒的信号,进而分析金纳米粒入胞及跨越肠道上皮细胞的过程和胞内分布,且不受背景的干扰,并能借助层扫模式,构建金纳米粒在细胞内分布的3D模型.因此,在不进行荧光探针偶联的条件下,通过反射光分析金纳米粒跨膜转运是准确、简便的方法.
