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8-羟基喹啉酮对HepG2细胞氧化性DNA损伤的诱导作用
目的 评估8-羟基喹啉酮( CuQ)对HepG2细胞的DNA损伤作用并阐明其可能的作用机制.方法 CuQ 0 ~4 μmol·L-1处理HepG2细胞不同时间后,通过单细胞凝胶电泳实验检测细胞DNA损伤;分光光度法测定过氧化氢酶活性;苯二醛法测定细胞内谷胱甘肽(GSH)水平;硫代巴比妥酸反应物(TBARS)法检测细胞内脂质过氧化水平;Western印迹法检测NF-κB p65的变化;免疫组化方法检测细胞内8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的表达水平.结果 HepG2细胞与CuQ 0.5~4μmol· L-1作用1h后,DNA的迁移距离明显增加(P<0.05),提示CuQ可引起DNA链断裂.CuQ能够造成细胞内GSH水平以及过氧化氢酶活性的降低.随着CuQ剂量的增加及染毒时间的延长,NF-κB由细胞浆逐渐转移至细胞核.CuQ还可以引起细胞内TBARS水平增高及8-OHdG表达水平的增强.采用GSH合成特异抑制剂DL-甲硫氨酸磺酰亚胺(BSO)预处理细胞,可明显增强CuQ对HepG2细胞DNA的损伤(P<0.05).结论 CuQ可造成HepG2细胞氧化性DNA损伤,其作用机制与氧化应激及NF-κB p65在细胞核蓄积增高有关.