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黑果枸杞内生真菌R43的次生代谢产物的研究
目的:对分离自黑果构杞根部的内生真菌R43进行鉴定,并对其发酵物的化学成分进行研究.方法:采用大米固体培养基对R43进行发酵;根据形态学特征和ITS序列对菌株R43进行鉴定;采用各种色谱方法分离乙酸乙酯提取物中的化学成分,并根据化合物的波谱数据确定结构.结果:经形态学特征及ITS序列鉴定菌株R43为塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis).从其发酵产物中分离得到6个化合物,分别为rubrofusarin B(1),campyrone A(2),asperpyrones A(3),2,5-二羟基-苯乙酸(4),麦角甾醇(5),甘露醇(6).结论:化合物4为首次从真菌发酵产物中分离得到.化合物1对大肠杆菌有很好的抑制活性,小抑菌浓度为1.95 μg· mL-.
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1株红树内生真菌BY5的鉴定及生物活性研究
目的 对分离自红树植物海马齿(Sesuvium portulacastrum)的1株内生真菌BY5进行鉴定,并对其发酵产物的生物活性进行研究.方法 采用形态学、28S rDNA序列对红树内生真菌BY5进行鉴定;采用滤纸片琼脂扩散法、自由基清除法(DPPH、·OH和ABTS+)和MTT法对其发酵液上清乙酸乙酯抽提物的抗菌、抗氧化和抗肿瘤活性进行研究.结果 菌株BY5的菌落形态和显微形态与曲霉属的基本相同,其28S rDNA序列与塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis)的相似度达100%,确定该菌株为塔宾曲霉;其发酵液上清乙酸乙酯抽提物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌有较强抑制作用;对DPPH自由基、·OH自由基和ABTS+自由基具有较强清除作用(0 mg/mL<EC50<10 mg/mL);对宫颈癌Hela细胞和人肝癌HepG2细胞具有较强的抑制作用,其IC50值分别为4.44和35.91 μg/mL.结论 红树内生真菌BY5具有开发抗菌、抗氧化和抗肿瘤药物的潜力.
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塔宾曲霉的纤维素降解及酶活特性
通过CMC-Na培养基分离、刚果红培养基初筛,筛选出降解纤维素菌株F8,经形态学及分子生物学鉴定其为塔宾曲霉(Aspergilus tubingensis).对F8进行产酶优化,滤纸酶活(FPA)适发酵时间是3d,CMCase适发酵时间是4d,适发酵温度为35℃.对发酵培养基正交优化,在碳源3%,氮源1.2%,初始pH 7.0,吐温-800.1%,发酵培养后FPA达183.25±9.14 U/mL.