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全血扩增文献资料
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全血和滤纸干血AS-PCR体系的缓冲液研究
目的:研制一种以全血和滤纸干血为模板的等位基因特异性PCR(allele-specific polymerase chain reaction,AS-PCR)体系的缓冲液.方法:采用血样直接作为模板,通过引入错配碱基对AS-PCR的特异性进行改进,研制一种新型缓冲液HPEC[pH 9.5,Mg2+ 3.5 mmol·L-1,海藻糖2.5μmol·L-1,(NH4)2SO49.6mmol·L-1,Tween-20 0.01％],对包含单核苷酸多态性位点(single nucleotide polymorphisms,SNPs)的目的片段进行扩增.结果:该方法成功地实现了以血样和滤纸干血为模板的AS-PCR基因分型.结论:此缓冲液省去了扩增前基因组的提取和纯化,简化了操作过程,降低DNA污染机会和检测技术的复杂性.
