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Resveratrol synthase基因文献资料
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利用基因转化提高虎杖毛状根中活性成分的含量
通过转白藜芦醇合酶(resveratrol synthase,RS)基因提高虎杖毛状根中主要活性成分--白藜芦醇(resveratrol,RE)和白藜芦醇苷(polydatin,PD)的含量.用改进的高盐低pH法提取葡萄基因组DNA,通过PCR扩增获得RS基因序列,构建表达载体pCAMBIA1300-35S-RS,然后采用冻融法转化发根农杆菌ATCC11325,继而浸染划伤的虎杖无菌幼苗叶片,PCR和RT-PCR法鉴定RS基因在虎杖毛状根中的整合与表达,高效液相色谱(highly effective liquid chromatography,HPLC)法测定转基因毛状根中RE及PD的含量.首次成功诱导获得转RS基因虎杖毛状根,经鉴定该基因已在虎杖毛状根中得到整合与表达,RE和PD的含量分别为17～187 μg·g-1 DW和836～1 970 μg·g-1 DW,而未转基因虎杖毛状根中RE和PD的含量分别为0～130 μg·g-1 DW和190～320 μg·g-1 DW.在所选取的不同根系中,转基因毛状根PD的含量均得到显著提高,高含量是未转基因毛状根的5倍,而RE含量提高不显著.
关键词： 虎杖 毛状根 Resveratrol synthase基因 白藜芦醇 白藜芦醇苷
