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双基因表达质粒pEgr-IFNγ-endostatin文献资料
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γ干扰素和内皮抑素双基因表达质粒在Lewis肺癌细胞中的辐射诱导表达
目的构建双基因表达质粒pEgr-IFN γ-endostattn并检测其在Lewis肺癌细胞中的辐射诱导表达.方法利用基因重组技术构建含Egr-1启动子的IFNγ和endostatin双基因表达质粒,脂质体介导体外转染Lewis肺癌细胞,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测不同剂量X射线诱导IFNγ和endostatin表达的量效关系和时程.结果酶切鉴定证实Egr-1启动子、IFNγ和endostatin基因正确插入双基因表达载体pIRES1neo;不同剂量X射线照射转染该重组质粒的Lewis肺癌细胞上清中IFNγ和endostatin表达量明显高于假照组(均P＜0.001),其中5Gy照后表达量高,分别为假照组的4.14倍和2.92倍;2GyX射线照后Lewis肺癌细胞上清中IFNγ和endostatin含量随时间延长而增加,照后36 h分别为照射前的3.75倍和3.02倍(均P＜0.001).结论本实验成功构建了双基因表达质粒pEgr-IFNγ-endostatin,该质粒具有辐射诱导双基因共表达增强特性.
