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腺病毒介导P53基因转染增加人胃癌细胞的放射敏感性
目的评价腺病毒介导p53基因(Adp53)转染对人胃癌细胞的凋亡效应和放射增敏作用.方法以重组腺病毒介导p53基因感染4种不同p53状况的人胃癌细胞,用免疫组织化学法和Western blot法检测P53蛋白在胃癌细胞中的表达;用细胞集落形成法检测细胞存活率;用TUNEL法检测细胞凋亡.胃癌细胞感染Adp53后照射4Gy,用流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡;胃癌细胞种植肿瘤内注射Adp53后照射6 Gy,以肿瘤相对体积增长曲线观察肿瘤抑制情况.结果1:100效靶比(MOI)Adp53产生细胞高转染率,以及p53基因在4种胃癌细胞中均高表达,并产生G2/M期阻滞、凋亡增加和细胞增殖抑制.如果以凋亡评价放射效应,Adp53转染对4Gy照射4种细胞的凋亡率比值为:W细胞3.0,M细胞3.6,neo细胞2.2,823细胞2.5.体内实验结果显示,Adp53对W细胞肿瘤6Gy照射的抑瘤率比值为1.41,而对M细胞肿瘤为1.91.结论腺病毒介导p53基因转染产生细胞凋亡并提高人胃癌细胞的放射敏感性,这种作用不依赖于细胞内在的p53状况.
关键词： 胃癌 放疗 腺病毒介导p53基因 -
腺病毒介导p53基因对人胃癌细胞热增敏的作用
目的评价腺病毒介导p53基因对人胃癌细胞热增敏的作用. 方法以重组腺病毒介导p53基因悬液(Adp53)感染4种不同p53状况的人胃癌细胞,用免疫组化法和Western blot法检测p53蛋白在胃癌细胞中的表达;用细胞存活分数来反映细胞增殖状况;用TUNEL法来检测细胞凋亡.感染Adp53的W和M胃癌细胞经42℃ 2h或43℃ 0.5 h加温后24 h,用流式细胞计检测细胞周期分布和凋亡;胃癌细胞的种植肿瘤内注射Adp53悬液后48 h,行43℃ 0.5 h加温,以肿瘤相对体积增长曲线观察肿瘤抑制情况. 结果高效靶比(100MOI)Adp53产生细胞高转染率和p53基因在4种胃癌细胞中均高表达,并产生G2/M期阻滞和凋亡及细胞增殖抑制.Adp53基因的作用不依赖胃癌细胞内在的p53状态.如果以凋亡作为热效应,Adp53对2种加温方式的热增敏比,对W细胞为1.6～3.3,而对M细胞为1.8～2.1.Adp53对W细胞肿瘤43℃ 0.5 h加温的热增敏比为1.7,而对M细胞肿瘤为1.6.结论腺病毒介导p53基因提高了人胃癌细胞的热敏感性,这种作用不依赖于细胞内在p53状况.本实验为p53基因治疗与热疗结合提供了可靠的实验依据.
关键词： 胃癌 热疗 腺病毒介导p53基因
