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  • ~(60)Co γ射线诱导EJ细胞DNA损伤及γH2AX表达的研究

    作者:潘艳;田梅;刘建香;阮健磊;苏旭

    目的 探讨不同剂量~(60)Co γ射线对EJ细胞DNA损伤的情况,不同剂量~(60)Co γ射线照射EJ细胞后诱导磷酸化组蛋白H2AX焦点形成,以及与γH2AX表达量的关系.方法 单细胞凝胶电泳检测DNA链断裂损伤情况.免疫荧光法检测不同剂量γ射线照射后立即、以及2 Gv γ射线照射后不同时间的EJ细胞中γH2AX焦点的数量.流式细胞分析法检测不同剂量γ射线照射后EJ细胞中γH2AX蛋白表达量的变化.结果 单细胞凝胶电泳结果显示,γ射线照射后DNA损伤情况明显加重,随照射剂量的增加,细胞尾矩不断加大,0 Gy组尾矩为0.24,4 Gy照射组尾矩为5.26;免疫荧光结果显示,随着照射剂量的增加,γH2AX焦点数目及大小均明显增加,照射的剂量范围从0.1-4 Gy均可检测,且照射剂量和焦点形成数目之间存在剂量.效应关系,0.1 Gy照射组每个细胞中的焦点数平均达12.37个,4 Gy照射组每个细胞中的焦点数平均达46个;2 Gy γ射线照射后24 h仍可检测到 γH2AX焦点,随时间延长焦点数目减少、强度减弱,具有时间依赖性.流式细胞检测结果表明,γ射线照射后 γH2AX蛋白表达量明显增加,呈现明显量效关系,0.1和4 Gy照射组γH2AX阳性细胞表达率分别为7.4%和29.2%.结论 免疫荧光法检测照射后γH2AX焦点数目比其他实验方法更能敏感、直观的反映DNA损伤及修复情况,有望成为检测辐射损伤的理想生物指标.

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