首页 > 文献资料
-
棕榈酸急性、慢性刺激对小鼠骨骼肌细胞腺苷酸活化蛋白激酶活性的影响
目的:探讨棕榈酸急性、慢性刺激对小鼠骨骼肌细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)活性的影响.方法:以体外培养并诱导分化成熟的C2C 12小鼠骨骼肌细胞为研究对象,观察棕榈酸急性(5-30 mins)或慢性(16 h)刺激对AMPK蛋白活性的影响.小鼠骨骼肌细胞AMPK蛋白磷酸化水平的测定采用免疫印迹法.结果:(1)棕榈酸急性刺激下,C2C12细胞AMPK蛋白活性水平成时间-浓度依赖性增加.其中当300 μM棕榈酸刺激15分钟时,与对照组相比,AMPK蛋白活性水平显著增加(P＜0.05);(2)与对照组相比,16 h棕榈酸慢性刺激可诱导C2C 12细胞AMPK蛋白活性水平显著增加(P＜0.05).结论:棕榈酸急性、慢性刺激均能诱导骨骼肌细胞AMPK活性增加,可以为一次性或持续性高脂膳食引起的血浆游离饱和脂肪酸过多造成的骨骼肌胰岛素抵抗的在体研究,提供简便实用的骨骼肌细胞模型.
关键词： 棕榈酸 磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶 C2C12细胞 -
桑叶提取物对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖摄取的影响及其分子机制
本文研究了桑叶多糖(mulberry leaves polysaccharides,MLP)、桑叶黄酮(mulberry leaves flavonoids,MLF)和桑叶水提物(mulberry leaves hot water extracts,MLE)对胰岛素抵抗状态下HepG2 (IR-HepG2)细胞葡萄糖摄取的影响,并探讨其分子机制.采用高浓度胰岛素(INS)持续作用于HepG2细胞24 h建立胰岛素抵抗模型,加一定剂量的MLP、MLF和MLE干预,添加或不添加胰岛素刺激,测定各组细胞的葡萄糖消耗量.Western blotting法检测磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)磷酸化水平及胰岛素信号通道PI3K关键酶蛋白激酶B(Akt)磷酸化水平.结果表明:MLP、MLF和MLE明显增加了细胞的葡萄糖消耗;MLE能明显提高IR-HepG2细胞AMPK磷酸化水平；MLP、MLF和MLE对Akt磷酸化没有影响,可以明显改善胰岛素抵抗状态下HepG2细胞对葡萄糖的利用,MLE的降糖作用机制可能与胰岛素无关,是通过AMPK通道促进葡萄糖的吸收而实现的.
关键词： 桑叶提取物 胰岛素抵抗 HepG2 糖代谢 磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶 -
适量酒精对棕榈酸引起的胰岛β细胞功能损伤的保护作用
目的 观察酒精、棕榈酸对胰岛β细胞(INS-1细胞)功能的影响.方法 INS-1细胞分为对照组、22mmol/L酒精(模拟适量饮酒)组、100mmol/L酒精(模拟大量饮酒)组、0.2 mmol/L棕榈酸(PA)组、PA+20mmol/L酒精组以及PA+100mmol/L酒精组.作用48 h后,采用放射免疫法检测糖刺激胰岛素的释放量,Westernblotting检测胰腺十二指肠同源异型盒因子1(PDX-1)、葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)和磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK,包括T-AMPK和P-AMPK)蛋白水平.结果 ①与对照组相比,20mmol/L酒精对INS-1细胞无显著影响(P＞0.05);100mmol/L酒精组和PA组均下调了INS-1细胞PDX-1、GLUT2蛋白水平和胰岛素释放量(P均＜0.05).相对于单独PA组,20mmol/L酒精和PA合用时显著增加细胞PDX-1、GLUT2蛋白水平和胰岛素释放量(P均＜0.05).100mmol/L酒精和PA合用时则未出现这种现象(P＞0.05);②与对照组相比,20mmol/L酒精对细胞AMPK表达和活化无明显影响(P＞0.05);100mmol/L酒精仅仅下调AMPK表达(P＜0.05);PA同时下调AMPK表达和活化(P＜0.05).当20 mmol/L酒精和PA合用时,可以改善由PA引起的AMPK表达和活化的下调(P＜0.05);而100mmol/L酒精与PA合用组则无明显变化(P＞0.05).结论 大量酒精和PA均能损害INS-1细胞功能;适量酒精(20 mmol/L酒精)能够改善由棕榈酸引起的胰岛β细胞功能损伤.
-
冬凌草甲素抑制结肠癌细胞HT-29的作用及其机制
目的 探讨冬凌草甲素抑制结肠癌细胞HT.29的作用及其机制.方法 浓度为1～50 μmol/L的冬凌草甲素分别作用结肠癌细胞或转染小干扰RNA (siRNA)的结肠癌细胞,噻唑蓝(MTT)法观察冬凌草甲素对结肠癌细胞活力的影响,Western blot检测冬凌草甲素作用的HT.29细胞中腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPKα)、磷酸化AMPKα (p-AMPKα)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、磷酸化ACC(p-ACC)、磷酸化p53(p-p53)、磷酸化S6K(p-S6K)及磷酸化S6(p-S6)的表达.结果 冬凌草甲素具有抑制结肠癌细胞活力的作用,其抑制作用呈时间剂量曲线,50 μmol/L的冬凌草甲素作用HT.29细胞72 h后的细胞活力低,为21.6％.随着作用时间和剂量的增加,HT-29细胞p-AMPKα、p-ACC和p-p53蛋白表达逐渐增加,p-S6K及p-S6的蛋白表达减弱.转染AMPKαsiRNA的结肠癌细胞活力为(73.3±2.8)％,明显高于转染错义siRNA组的细胞活力[(19.5±1.2)％],两组间差异有统计学意义(P＜0.05),p-AMPKα、p-ACC、AMPKα和p-p53蛋白表达强于转染错义siRNA组,而p-S6的蛋白表达弱于转染错义siRNA组.结论 冬凌草甲素通过AMPKα活化通路抑制HT-29细胞活力.冬凌草甲素抑制结肠癌细胞活力与p-AMPKα、p-p53蛋白激活及p-S6K与p-S6的蛋白抑制相关,p53、S6可能是冬凌草甲素抑制结肠癌细胞p-AMPKα活化通路的下游蛋白.
关键词： 冬凌草甲素 结肠癌 磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶 磷酸化P53 磷酸化S6
