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杂交遗传文献资料
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+10 Gz重复暴露大鼠脑差异表达基因cDNA文库的构建
目的 构建+10 Gz重复暴露大鼠脑差异表达基因的消减cDNA文库.方法 本实验用SD大鼠,分别提取暴露组与对照组的总RNA,并分离纯化mRNA,应用抑制性消减杂交技术分离+10 Gz重复暴露大鼠脑差异表达基因cDNA片段并建立消减cDNA文库;利用PCR对随机挑选的75个白色菌落进行插入片段的验证,对其中70个克隆进行cDNA斑点杂交验证.结果 所构建的cDNA文库扩增后包含约400个白色克隆和100个兰色克隆,随机挑选75个白色克隆入质粒载体后共获得70个阳性克隆.结论 应用抑制性消减杂交技术成功构建了+10 Gz重复暴露大鼠脑差异表达基因消减cDNA文库,为进一步筛选和克隆脑损伤相关基因奠定了基础.
