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人脑胶质瘤 U87 细胞文献资料
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miR-17靶向调控 MMP-2基因对人脑胶质瘤 U87细胞侵袭性的影响
目的：探讨人脑胶质瘤 U87细胞中微小 RNA-17（microRNA-17，miR-17）和基质金属蛋白酶（matriv metal-loproteinase，MMP）-2基因的表达，阐明 miR-17对 MMP-2基因的靶向调控作用以及对 U87细胞侵袭性的影响。方法培养 U87细胞并应用免疫荧光化学技术检测 MMP-2基因的表达；采用生物信息学方法对 miR-17和 MMP-2基因的匹配关系进行预测并应用双荧光素酶报告基因系统鉴定；转染 miR-17模拟物后，行实时 PCR 检测 miR-17和MMP-2基因的表达，Western 印迹检测 MMP-2蛋白的表达，Transwell 小室检测癌细胞体外的侵袭性。结果倒置相差显微镜下可见 U87细胞分布均匀，多样性明显；细胞免疫荧光表明胞质内有 MMP-2蛋白的表达，显示绿色荧光。靶基因预测软件 miRanda 和 TargetScan 显示 miR-17和 MMP-2基因匹配良好，双荧光素酶报告基因系统鉴定发现 miR-17可结合 MMP-2 mRNA 3′UTR 并有效抑制其表达。实时 PCR 和 Western 印迹检测结果均表明 miR-17的过表达可下调 MMP-2基因表达。Transwell 实验表明 miR-17的过表达可抑制 U87细胞的侵袭。结论miR-17通过靶向作用于 MMP-2 mRNA 3′UTR 负性调控人脑胶质瘤 U87细胞中 MMP-2的表达并可抑制其侵袭作用。
关键词： 微小 RNA 基质金属蛋白酶-2 人脑胶质瘤 U87 细胞
