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CLIP相关技术的研究进展
在真核生物基因表达的转录后调节中,RNA结合蛋白( RBP)起着关键作用,很多RBP的异常与人类疾病的发生密切相关。自2000年的RNA免疫沉淀和芯片分析方法( RNA immunoprecipitation with differential display or microarray analysis , RIP-ChIP)出现以来,人们开始就RBP与RNA相互作用进行了系统而广泛的研究。经过改良和发展,基于体内实时紫外交联免疫沉淀法( ultraviolet crosslinking and immunoprecipitation , CLIP )、交联免疫沉淀cDNA文库高通量测序法( high-throughput sequencing of CLIP cDNA library , HITS-CLIP)、光催化核糖核苷增强交联和免疫沉淀法( photoactivatable-ribonucleoside-enhanced crosslinking and immunprecipitation , PAR-CLIP)以及提高个别核苷酸分辨率交联和免疫共沉淀法( individual nucleotide resolution CLIP , iCLIP)等RIP-ChIP衍生方法相继产生,使用这些方法,可以解析RBP的RNA识别特异性,而且通过与高通量测序技术结合,可以实现转录组尺度的RBP的靶序列的鉴定,分辨率也得到极大提高。该文就RNA与蛋白的相互作用的基本原理及其研究进展、相关技术存在的问题以及发展趋势进行简要综述。