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补肾养血明目方对ARPE-19细胞氧化损伤的保护机制研究
目的 探讨补肾养血明目方对氢醌(hydroquinone,HQ)诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)氧化损伤的保护机制.方法 采用HQ制作ARPE-19细胞氧化应激损伤模型,分为正常对照组,模型组,空白肠吸收液组,预防给药组和治疗给药组.分别采用TUNEL技术观察细胞凋亡情况,免疫组化技术检测8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的表达情况,化学发光法测定细胞内ATP含量,荧光法测定活性氧(ROS)水平,化学比色法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量.结果 与氧化损伤模型组相比,补肾养血明目方可减少ARPE-19细胞凋亡,抑制细胞内ATP的水平下降,减少ROS的生成,减少RPE细胞8-OHdG阳性表达率,提高抗氧化酶(SOD和GSH-Px)的含量.结论 线粒体保护是补肾养血明目方发挥抗HQ诱导的ARPE-19细胞氧化损伤的重要途径.
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补肾养血明目方含药肠吸收液对ARPE-19细胞氧化损伤的保护作用
目的:探讨补肾养血明目方含药肠吸收液对氢醌(hydroquinone,HQ) 诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19) 氧化应激损伤的保护作用.方法:采用不同浓度HQ诱导体外培养ARPE-19 细胞氧化损伤,确定佳造模浓度;制备补肾养血明目方含药肠吸收液.采用CCK-8法检测补肾养血明目方含药肠吸收液对ARPE-19细胞活力的影响,TUNEL技术观察其对细胞凋亡的保护作用,以及化学比色法检测细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的活性.结果:当HQ浓度达到90滋mol/L以上时,ARPE-19 细胞活性明显降低.相较于模型组,预防给药时,浓度1%和2%补肾养血明目方含药肠吸收液对HQ损伤具有有显著保护作用(均P<0.01),0.5%和5%含药肠吸收液对HQ损伤有一定保护作用(均 P<0.05);治疗给药时,1%和2%含药肠吸收液对 HQ 损伤有一定保护作用(均 P<0郾05).与模型组相比,预防组的细胞凋亡率显著下降(P<0.01),治疗组的细胞凋亡率有一定下降(P<0.05).抗氧化酶检测结果显示与模型组相比,预防组和治疗组均能明显提高SOD和GSH-Px含量(均P<0.05),其中预防组的作用更为显著(P<0.01,P<0.05).结论:补肾养血明目方对HQ诱导的ARPE-19 细胞氧化损伤有保护作用,其作用机制可能与增加细胞内抗氧化酶的含量有关.
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补肾养血明目方对丙烯醛致 ARPE-19细胞氧化应激的干预作用
目的：利用丙烯醛建立ARPE-19细胞氧化应激模型,观察补肾养血明目方含药血清对丙烯醛诱导ARPE-19细胞氧化损伤的保护作用。
方法：制备SD 大鼠补肾养血明目方含药血清及空白血清,通过CCK-8检测不同浓度(2.5%,5%,10%,20%,40%)血清对细胞活性的影响,预先加入1.25%,2.5%,5%等不同浓度的含药血清处理24 h 后,将终浓度为75μmol/L的丙烯醛加入对数生长期的ARPE-19细胞中处理24h, CCK-8法检测含药血清对细胞活力的影响, DAPI染色观察细胞核形态。
结果：CCK-8结果示：低浓度(2.5%,5%)血清对细胞活性影响不大( P>0.05),高浓度(10%,20%,40%)血清降低细胞活性(P<0.05),补肾养血明目方含药血清中、高剂量组细胞活性较空白血清组有统计学意义(P<0.05)；
结论：补肾养血明目方对丙烯醛诱导的ARPE-19细胞损伤有保护作用。关键词： 补肾养血明目方 ARPE-19 细胞 丙烯醛 氧化应激
