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小鼠耳蜗血管纹血-迷路屏障免疫组织化学研究
目的 利用免疫组织化学、免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜技术研究小鼠血管纹组织形态、血-迷路屏障的组成,为耳蜗血管纹血-迷路屏障病理生理学研究提供基础.方法 快速分离出完整的小鼠血管纹组织,应用免疫组织化学、免疫荧光染色等方法对血管纹上各层组织、细胞进行标记,利用激光共聚焦显微镜详细观察其形态结构特点,观察血-迷路屏障的组成及形态特点.结果 完整解剖出小鼠的血管纹组织呈自然弯曲状态,颜色为半透明淡红色,免疫荧光染色观察三层细胞,边缘细胞呈近圆形的多边形,致密排列,其紧密连接蛋白呈线性分布;基底细胞呈扁长形连成一片;毛细血管网夹于边缘细胞与基底细胞之间贯穿血管纹全程,周细胞伴行血管并包裹毛细血管;中间细胞的血管周巨噬细胞呈树枝样,其足突伸出与微血管壁紧密接触.结论 边缘细胞、中间细胞、基底细胞及毛细血管网构成耳蜗血管纹的基本结构,毛细血管内皮细胞、基底膜、周细胞、血管周巨噬细胞通过细胞间的紧密连接共同组成血-迷路屏障.
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耳蜗血管纹血-迷路屏障病理生理学研究进展
血管纹和螺旋韧带位于耳蜗中阶外侧壁,其中血管纹的血-迷路屏障(blood-labyrinth barrier,BLB)是高度分化的毛细血管网,用于调控耳蜗血液和细胞间液的物质交换.此屏障保护内耳不接触来自血液的有毒物质,并且选择性的透过离子、液体及营养物质至耳蜗.血-迷路屏障对维持耳蜗内稳态有重要的作用.血迷路屏障结构上包括血管纹微血管内皮细胞(endothelial cells,ECs)、周细胞(pericytes,PCs)、血管周围巨噬细胞样黑色素细胞(perivascular resident macrophage-like melanocytes,PVM/Ms)、基膜(basement membrance,BM)、复杂的紧密连接和黏合连接.ECs、PCs和PVM/Ms间的作用,类似于细胞间信号传导,对控制血管渗透性及为听功能提供适宜的环境起着至关重要的作用.在遗传缺陷、炎症、声损伤以及衰老的病理条件下,血-迷路屏障各组份间正常的相互作用遭到破坏,进而导致其通透性增加,引发听力障碍.
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颅内感染鼠巨细胞病毒对新生小鼠血-迷路屏障通透性的影响
目的 探讨新生小鼠鼠巨细胞病毒(MCMV)性耳聋发病过程中血迷路屏障通透性的改变及其可能机制.方法 66只新生BALB/C小鼠随机均分为三组:A组颅内注射MCMV 15 μl;B组颅内注射生理盐水15 μl;C组作为空白对照.3周后声电屏蔽下行听觉脑干反应(ABR)检查后取两侧耳蜗,伊文思蓝甲酰胺法检测血迷路屏障通透性,光镜下观察内耳病理变化.结果 与B、C组相比,A组小鼠ABRⅠ波潜伏期延长,波幅降低,听力阈值和耳蜗伊文思蓝含量升高(P＜0.05).光镜下A组小鼠耳蜗前庭阶、鼓阶有出血现象,血管纹及螺旋韧带内有较多炎症细胞浸润;B、C组小鼠耳蜗无上述变化.结论 新生小鼠颅内感染MCMV后,血迷路屏障通透性增高是发生MCMV性耳聋的一个重要环节.
