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白癜风皮损组织中黑素细胞谱系特异性标记基因检测
目的 针尖皮肤切削术结合逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测白癜风皮损组织中黑素细胞谱系特异性标记基因的表达,旨在预测治疗后白癜风皮损出现毛囊复色的可能性.方法 选取6例就诊于武汉大学人民医院皮肤科静止期白癜风患者和4例健康志愿者,用针尖皮肤切削术对受试者白斑的中心、近边缘和周边“正常皮肤”处活检,抽提组织总RNA,用RT-PCR技术测定标本中多巴色素异构酶(Dct),酪氨酸酶(Tyr)和管家基因β-肌动蛋白(ACTB)mRNA的表达.结果 (1)用针尖皮肤切削术获取不同大小(3 mg和7 mg)的组织标本并与负压吸疱法采集的表皮片进行比较,结果显示针头切削术获取7 mg组织,经研磨异硫氰酸胍-苯酚(Trizol)法抽提总RNA,能在正常皮肤组织中检测到3种基因表达.同时对10例针尖皮肤切削术后的局部伤口愈合进行了追踪随访,1个月后10例均正常愈合,未见瘢痕形成.(2)白癜风皮损黑素细胞谱系特异性标记基因检测:皮损中心区检测出3种模式,即Dct+Tyr-ACTB+,Dct-Tyr-ACTB+和Dct+Tyr+ACTB+.对1例检测结果“Dct+Tyr-ACTB+”的患者施以308 nm准分子光照射2次,皮损即出现毛囊复色.结论 针尖皮肤切削术结合RT-PCR技术检测白癜风皮损组织中黑素细胞谱系标记基因表达,是一种有价值的预测白癜风皮损可能出现毛囊复色的微创准确方法.